1. 液相色谱的蠕动泵原理
拓扑异构酶，帮助解开复制叉前后的超螺旋结构。
DNA解旋酶，解开螺旋Rep蛋白帮助解开双螺旋结构。
引物合成酶，催化RNA引物合成并与DNA链互补的反应。
单链结合蛋白稳定单连区。
DNA聚合酶Ⅰ消除引物，填满裂缝。
DNA聚合酶Ⅲ合成DNADNA。
连接酶连接DNA末端RNA聚合酶沿DNA模板转录一短的RNA分子。
DNA合成仪合成原理：
DNA的固相合成:即DNA3'端固定于基质上，然后沿3'向5'方向依次添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。
合成过程:
第一个碱基的3‘末端固定在树脂上，下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护，碱基上的氨基用苯甲酸保护，然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。
1.1个碱基的5’-OH和下个碱基的3‘-OH形成亚磷酸三酯，
2.然后用碘氧化成磷酸三酯
3.加入二氯乙酸除去第二个碱基5’-OH上的保护剂DMT
循环进行加入下一个碱基合成完毕后
1.用苯硫酚除去5’-OH上的保护剂DMT
2.用浓氢氧化铵将片段与固体树脂断开，洗脱
3.用浓氢氧化铵在加热的条件下除去碱基上的保护剂
4.除去氢氧化铵，真空抽干
5.液相色谱或者PAGE，回收片段最长的。
2. 液相泵的构造
色谱泵，检测器，色谱柱，溶剂系统，工作站
3. 液相色谱常用的泵
高校液相色谱中，梯度洗脱是指输液泵最少2元以上的，就是至少有2个泵。一般常用的紫外检测器，荧光检测器，蒸发光散射检测器，质谱检测器等都可以用于梯度洗脱。但是对于示差折光检测器是不能用于梯度洗脱的。
4. 高效液相色谱仪泵原理
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。
高效液相色谱法有“四高一广”的特点：
①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。
②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。
③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。
⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
扩展资料
高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。
在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用，但凝胶的孔径比分子筛要大得多，一般为数纳米到数百纳米。
溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离，而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后，随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。
在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻，因此就直接通过柱子，首先在色谱图上出现，一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中，这些组分在柱上的保留值最大，在色谱图上最后出现。
5. 液相色谱仪的泵
高效液相色谱也叫高压液相色谱、其最主要的设备就是加压泵（高压泵）、高压泵主要是柱塞泵、也有用隔膜泵的！柱塞泵压力高价格合适、隔膜泵价格贵一些！