培养基九公分自动定量灌装机(预灌装平皿培养基)

海潮机械 2023-01-16 17:47 编辑:admin 61阅读

1. 预灌装平皿培养基

首先用手摸一下培养基,以不烫手为最佳,然后打开皿盖,进行倒平板,然后倒置。

2. 培养皿装多少培养基

5~6个

  1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉。

  2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。

  3.倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。

  4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。

  在分子生物学试验中LB培养基常常用于培养细菌。如菌种的扩繁、转化体的筛选等。培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌。LB液体培养基与固体培养基的基本物质相同,只是在液体培养基之上再加入一定量的琼脂。

3. 培养皿基质

动物细胞贴壁培养的方法有组织块培养法和消化培养法。贴壁细胞培养方法操作步骤:

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

5.将培养板在5%CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 实验要点及说明:1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。贴壁培养的优点:容易更换培养液;细胞紧密黏附于固相表面,可直接倾去旧培养液,清洗后直接加入新培养液。容易采用灌注培养,从而达到提高细胞密度的目的;因细胞固定表面,不需过滤系统。当细胞贴壁于生长基质时,很多细胞将更有效的表达一种产品。同一设备可采用不同的培养液/细胞的比例。适用于所有类型细胞。 贴壁培养的缺点:与悬浮培养法相比扩大培养比较困难,投资大;占地面积大;不能有效监测细胞的生长;

4. 培养基分装到培养皿

错误。培养皿和培养基都需要先灭好菌,然后待培养基冷却到50℃左右再倒培养皿。

5. 培养基罐装实验

培养基灌装的培养温度可以在进行完培养基的促生长实验后,选择一个20-35度的温度进行培养,但是培养箱的温度需要控制在 ±2.5oC.

6. 平皿培养基的制备

测定牛乳、饮水和尿液等标本细菌数时常用此方法。将标本经适当稀释后,取一定量加入已灭菌的平皿内,倾入已溶化并冷却至45℃左右的定量培养基,混匀,待凝固后倒置、培养。

根据培养基内的菌落数和稀释倍数,即可计算出标本的细菌数。

7. 预灌装平皿培养基适用性试验

用途:

A.细菌的分离、B.菌落特征观察

C.药敏试验、D.活菌计数

培养平板培养基是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板。也叫平面培养基、平皿培养基。

平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定接种空间杂菌数。