1. 凯氏定氮仪装置图
溴甲酚绿-甲基红混合指示剂在碱性溶液中呈绿色、蓝绿色。没变色说明吸收液中氨的量不够，有可能的原因:蒸馏时加入的NaOH量不够；漏斗下端未保持液封，有氨逸出；微量凯氏定氮蒸馏装置的密封性不好；消化时加入的硫酸钾过多，使消化体系温度过高，引起已生成的铵盐发生热分解而造成氨损失。
2. 凯氏定氮仪器
根据凯氏定氮原理测定需要三个步骤，即消化、蒸馏、滴定。
消化：将含氮的有机化合物（蛋白质）与浓硫酸和催化剂（硫酸铜或凯氏消化片）一同加热，使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出，而样品中的有机氮转化为氨（NH3)并与硫酸结合形成硫酸铵。(铵 NH4+）
消化过程：微火加热煮沸，烧瓶内物质炭化变黑，产生大量泡沫，泡沫消失后加大火力保持微沸状态，至液体成蓝绿色澄清状态后继续加热 05-1h，结束后冷却。（可使用自动消解仪完成前处理工作）
蒸馏：得到的溶液经稀释定容后加入NaOH，蒸馏释放出NH3，冷凝之后收集于硼酸溶液中。
蒸馏过程：先将消化好的样品进行稀释，加入NaOH，经过加热后产生的氨气进入冷凝管，经过冷凝之后流入装有硼酸溶液的接收瓶中。形成硼酸铵。（硼酸溶液中加有混合指示剂，形成硼酸铵之后吸收液由酸性变为碱性，颜色由紫红转变为蓝绿色。）
滴定：用已知浓度的盐酸标准溶液进行滴定，根据盐酸消耗的量来计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子，即得到蛋白质的含量。（滴定是指一种定量分析的手段，也是一种化学实验操作。它通过两种溶液的定量反应来确定某种溶质的含量，是根据指示剂的颜色变化指示滴定终点，然后目测标准溶液消耗体积，计算分析结果。）
滴定过程：用盐酸标准溶液滴入硼酸铵溶液中，使溶液的颜色由蓝绿色变为浅红色。
3. 凯氏定氮装置图片
凯氏定氮法是分析有机化合物含氮量的常用方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，计算出样品中的氮量。
首先将待测物中的氨在加强热及硫酸铜催化，浓硫酸作用下，生成硫酸铵。此过程最终溶液需要呈蓝绿色澄清透明溶液。
第二步是在溶液中加入氢氧化钠，通过蒸馏释放出氨，收集于硼酸溶液中。硼酸溶液中提前加入甲基红-溴甲酚绿指示剂，可以观察到溶液由暗红色变为绿色。
最后用已知浓度的盐酸或硫酸标准溶液滴定，根据标准酸溶液的消耗量计算出氮的含量。滴定过程中，溶液颜色由绿色变为灰绿色为终点。
4. 凯氏定氮仪结构图
凯氏定氮加入有大量的硫酸钾和少量硫酸铜，加热时溶解，冷却后过饱和在浓硫酸中析出结晶
5. 凯氏定氮法装置图
凯氏定氮仪优点
对于所有样品的测定都适用是凯氏定氮法的优点。能够在测定动、植物的各种组织、器官以及食品、土壤等成分复杂的蛋白质的含量时被使用。特别是样品溶液浑浊,用其他方法不能测定,可靠的结果能够通过采用凯氏法获得。
凯氏定氮仪缺点
1、和理论含氮量相比，含碱性氨基酸、酰胺和小分子量氨基酸(甘氨酸、丙氨酸等)偏多的蛋白质含氮量明显非常高，导致测定结果偏高。
2、有着相当繁琐的操作过程，要求操作者具有很高的技术熟练度，实验室空气中氨含量会对其产生影响。
3、测定值会由于样品中的非蛋白氮而偏高,所以，在测定前需要先将与样品共存的非蛋白氮去除。
6. 凯氏定氮仪参数
因为有硫酸铜所以显蓝色，
试剂: 所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。 2.1 硫酸铜。 2.2 硫酸钾。 2.3 硫酸。 2.4 2%硼酸溶液。 2.5 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 2.6 40%氢氧化钠溶液。 2.7 0.025mol/L硫酸标准溶液或0.05mol/L盐酸标准溶液。