厌氧培养箱里面的黑白颗粒(厌氧培养箱和二氧化碳培养箱)

海潮机械 2023-01-06 23:54 编辑:admin 283阅读

1. 厌氧培养箱和二氧化碳培养箱

厌氧菌(anaerobic bacteria)也叫厌气菌。是一类在无氧条件下比在有氧环境中生长好的细菌,而不能在空气(18%氧气)和(或)10%二氧化碳浓度下的固体培养基表面生长的细菌。这类细菌缺乏完整的代谢酶体系,其能量代谢以无氧发酵的方式进行。它能引起人体不同部位的感染。

厌氧培养6天未生长:

1、培养基受污染,无法提供厌氧菌生长的基本营养;或者说厌氧细菌培养受抑制;

2、厌氧环境不达标,不能满足厌氧菌的(18%氧气)和(或)10%二氧化碳浓度下生长条件;

3、样本中压根就没有厌氧菌的存在。

2. 厌氧培养箱气体

细菌厌氧培养

1.

厌氧缸法:将接种标本的平板或液体培养基试管放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学方法除去缸内氧气,造成无氧环境,以利于专性厌氧菌生长。常用的方法有抽气换气法和气体发生袋法。

2.

厌氧袋法:即在无毒、透明不透气的塑料袋内造成无氧环境培养厌氧菌。塑料袋内装入气体发生管、美蓝指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种细菌的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美蓝指示剂管,若美蓝无色表示袋内已达无氧状态,可置于35℃培养箱内孵育。

3.

厌氧手套箱:是公认的培养厌氧菌的最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱,箱前面有一个有机玻璃透明面板,板上装有两个手套,可通过手套在箱内进行操作。这种厌氧箱适于培养基还原、厌氧菌标本接种、分离培养、生化鉴定和体外药敏试验等厌氧菌培养的全套操作。

4.

焦性没食子酸法:在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性没食子酸,然后再混入碳酸氢钠粉末或滴入氢氧化钠溶液,迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面,用融化的石蜡封边,造成一个封闭空间。焦性没食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养。

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3. 厌氧培养箱使用方法

答:鱼缸底滤厌氧技巧如下

一、疱肉培养基法

       疱肉培养基法是最简单的厌氧培养法之一,无需特殊设备。将疱肉和肉汤装入大试管,在液面加入凡士林封闭,从而造成无氧环境。在使用前最好将装有培养基的试管沸水浴10-20min,以使培养基中溶解的氧释放出来。

二、厌氧罐法

       厌氧罐法是目前应用较广泛的一种厌氧培养方法,是用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而进行厌氧菌的培养。厌氧罐法又分为以下两种:

1、抽气换气法

       该法适用于一般实验室,其特点是较经济,可迅速建立厌氧环境。标本接种后,将平板放入厌氧罐,拧紧盖子,用真空泵抽出罐中空气,使压力真空表至-79.98KPa,停止抽气,充入高纯氮气使压力真空表指针回0 位。连续反复3次,最后在罐内-79.98KPa 的情况下,充入70%的N2、20% H2、10% CO2 (或20% CO2、80% H2)。

        罐中需放入冷催化剂钯粒,可催化罐中残余的O2和H2化合成水。同时罐中应放有美蓝指示管,美蓝在有氧的环境下呈蓝色,无氧时为红色。临用前首先将美蓝煮沸使变成无色,放入罐中先呈浅蓝色,待罐中无氧环境形成,美蓝即可持续无色。

2、气体发生袋法

       气体发生袋系由锡箔密封包装,其中含有两种药片,一种为含枸椽酸和重碳酸氢钠的药片,另一种是含有硼氢化钠的药片。前者遇水放出二氧化碳,后者可释放氢。

        使用时在袋的右上角剪一小口,灌进10ml 蒸馏水,立即放入含有钯粒、指示剂及平板培养基的厌氧罐中,拧紧盖子。经2-3 分钟后,可感到盖子微热并有少量水蒸气出现。密封后1小时左右罐中的O2的含量可低于1%。

三、厌氧袋法

       厌氧袋法即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。该方法不需要特殊设备,操作简单,使用方便,不但实验室中可用,而且外出采样,现场接种等也可用。原理与气体发生袋法完全相同,只是采用塑料袋代替了厌氧罐,气袋为一透明而密闭的塑料袋,内装有气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。其操作方法为首先将接种的平板培养基放入袋中,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。然后先折断气体发生管,20分钟后再折断美兰指示

4. 二氧化碳培养箱灭菌

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5. 二氧化碳培养箱和恒温培养箱

二氧化碳既是细胞的代谢产物,是细胞生长的必需成分,又与维持培养液的pH有关。

细胞的培养中,氧气、二氧化碳都是细胞生长的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环,为细胞生存、代谢与合成提供能量;二氧化碳既是细胞的代谢产物,是细胞生长的必需成分,又与维持培养液的pH有关。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2—7.4。CO2既是细胞代谢产物也是细胞所需成分,主要与维持培养液的pH有直接关系。动物细胞多数需要微碱性环境,pH为7.4左右。在细胞培养过程中,随着CO2释放量的增多,培养基会变酸,因此常加入NaHCO3来调节pH。NaHCO3具有释放CO2的倾向,加入CO2可以抑制这个反应的进行。养箱中CO2浓度应与培养液中NaHCO3浓度相平衡,在细胞培养中,以5%的二氧化碳气体比例为宜。

6. 二氧化碳培养箱是厌氧培养箱吗

自然界有一部分菌在无氧条件下比在有氧环境中生长好的细菌,而不能在空气(18%氧气)和(或)10%二氧化碳浓度下的固体培养基表面生长的细菌,叫厌氧菌(anaerobic bacteria)也叫厌气菌。

如果我们需要得到厌氧菌或其代谢产物,就必须制造厌氧环境,厌氧罐就是专门为培养厌氧菌造的,它能在断绝与空气接触 的条件下, 依赖兼性厌氧菌和专性厌氧菌的生物化学作用,对有机物进行生物降解 ,即厌氧生物处理法或厌氧消化法。厌氧发酵罐主要用来满足微生物的厌氧生活条件,使它们在合适的环境中生活,以达 到发酵旺盛的目的。 厌氧发酵罐是一种高效的多级内循环厌氧反应罐。

7. 二氧化碳培养箱的使用

CO2培养箱是细胞、组织、细菌培养的一种先进仪器,是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备,广泛应用于微生物、医学、制药、环保、食品、畜牧等科学领域的研究和生产。

其原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌、病毒生长繁殖的人工环境,如控制一定的温度、湿度、气体等,主要用于组织培养和一些特殊微生物的培养。

8. 厌氧培养箱和二氧化碳培养箱的区别

厌氧呼吸和无氧呼吸的区别

1、性质不同:无氧呼吸是在厌氧条件下,厌氧或兼性厌氧微生物以外源无机氧化物或有机物作为末端氢(电子)受体时发生的一类产能效率较低的特殊呼吸。有氧呼吸是指细胞在氧的参与下,通过多种酶的催化作用,把有机物彻底氧化分解,产生二氧化碳和水,释放能量,合成大量ATP的过程。

2、特点不同:有氧呼吸是高等动、植物进行呼吸作用的主要形式。无氧呼吸是一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物(个别为有机氧化物)的生物氧化。

3、阶段不同:有氧呼吸分为三阶段,其中第三阶段有氧气参与,使有机物完全分解,释放大量能量,无氧呼吸分为两阶段,没有氧气参与,有机物不完全分解。