1. 生物灭菌器
1、压力蒸汽灭菌器根据冷空气排放方式的不同，分为下排气式和预真空式二大类。下排气式压力蒸汽灭菌器也称重力置换式压力蒸汽灭菌器，其灭菌是利用重力置换的原理，使热蒸汽在灭菌器中从上而下，将冷空气由下排气孔排出，排出的冷空气由饱和蒸汽取代，利用蒸汽释放的潜热使物品达到灭菌。预真空压力蒸汽灭菌器的灭菌原理是利用机械抽真空的方法，使灭菌柜室内形成负压，蒸汽得以迅速穿透到物品内部进行灭菌。根据抽真空次数的多寡，分为预真空和脉动真空二种，后者因多次抽真空，空气排除更彻底，效果更可靠。
2、压力蒸汽灭菌器可以使用外来的管道蒸汽，也可以使用与压力蒸汽灭菌器配套的电蒸汽锅炉随时生产蒸汽。一些小型的下排气式压力蒸汽灭菌器还可以通过电炉、煤气炉加热灭菌锅内的水并使之产生蒸汽达到灭菌目的。一般来说，外来管道蒸汽的汽源较充足，适于较大型的压力蒸汽灭菌器，电蒸汽锅炉单位时间产生的蒸汽量通常较小，需要较长的加热时间。
3、传统的压力蒸汽灭菌器为单门，随着人们对无菌操作的要求越来越严，双侧开门的压力蒸汽灭菌器越来越多，这类灭菌器特别适用于有清洁区、污染区之分的场所，专门处理由污染区进入清洁区的污染物品，医院、药厂的一些灭菌物品在生产过程中也常使用双门压力蒸汽灭菌器。
4、根据蒸汽管在灭菌锅内的位置有套层式、套管式之分，前者的蒸汽管在灭菌锅腔体外，是经典的方式，具有不占容积、便于灭菌物品排放和便于灭菌锅维护的特点。后者的蒸汽管在灭菌锅腔体内，具有加工较方便，传热面积广、加热更直接迅速的特点。
5、由于压力灭菌器的容积大小与灭菌效果和监测方法有关，标准化委员会将容积小于60升的压力蒸汽灭菌器归为小型压力蒸汽灭菌器。根据灭菌器的形状特性，还有立式、卧式、台式、移动式压力蒸汽灭菌器的区别。
6、普通的压力蒸汽灭菌器在设计时一般不考虑排出的冷空气对环境的污染，但处理有传染性的物品时需要对冷空气进行消毒处理，特别是生物安全实验室的压力蒸汽灭菌器在排气管道上都应该有冷空气消毒处理装置。
2. 生物安全灭菌器
一、医院消毒灭菌效果监测：
1.必要性：
①消毒灭菌效果监测方法专业性强，不检验不知道结果；
②新建病房、新消毒设备、新消毒剂均应做效果监测。
③特殊对象、特殊需要，必做效果监测。如移植术前、ICU病房、危重病人等。
2.科学性：以科学的试验设计、熟练的技术、可靠的结果、确切地分析，得出结果评价。
3.规范性：以权威规范为依据，符合其基本原则要求。如检测时机的确定、标准菌株的选择、标本数、重复次数、实验方法等确立。
二、监测方法的分类：
1、根据检测方法性质分：
①物理方法：测量压力灭菌温度、测量紫外线强度等；
②化学方法：各种化学指示卡；
③生物方法：嗜热/枯草芽孢灭菌效果监测自然菌存活数监测；
2、根据消毒灭菌对象性质分：
①空气消毒：
②表面消毒：
3.根据具体消毒对象分：
①压力蒸汽灭菌：
②各种器械：
③化学消毒剂：
④紫外线灯杀菌效果：
⑤手和皮肤消毒效果：
⑥空气消毒效果：
⑦物体表面消毒效果：
三、必要条件：
1、专业实验室：
2、必备设备器材：
3、选择实验方法：
4、熟练实验技术：
四、卫生部对500张床位以上医院感染管理的质量指标规定：
（1）医院感染率≤10%；灭菌切口感染 ≤0.5%
（2）医院感染的漏报率≤20%；
调查样本量不少于年监测病人数的10%
（3）医院必须对消毒、灭菌效果定期进行监测。
灭菌合格率必须达到100%
（4）使用中的消毒剂、灭菌剂应进行生物和化学监测。消毒剂每季度生物监测1次，细菌含量必须<100cfu/ml，不得检出致病微生物；灭菌剂每月检测1次，不得检出微生物。化学监测应根据消毒、灭菌剂的性能定期监测。
（5）压力蒸气灭菌进行工艺、化学和生物监测。环氧乙烷必须每锅进行工艺监测，每包进行化学监测，每月进行生物监测。压力蒸气锅每天第一锅必须做B-D试验。
（6）紫外线灯强度监测：每季度1次；新灯管30W≥90µW/cm2,旧灯管≥70µW/cm2
（7）胃肠镜等诊疗器材消毒标准不得检出致病微生物；腹腔镜、关节镜等应灭菌处理，不得检出任何微生物。
（8）进入人体组织、血液、器官的医疗用品应灭菌处理，不得检出致病微生物；接触黏膜医疗用品细菌总数≤20cfu/g（或100 cm2）；接触皮肤的医疗用品细菌总数≤200cfu/g（或100 cm2），不得检出致病微生物。
（9）母婴同室、婴儿室物体表面和医护人员手不得检出沙门氏菌。
（10）医院各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌数标准：
环境 类 别 空气 物体表面 医护人员手
cfu/cm3 cfu/cm2 cfu/cm2
Ⅰ类 层流洁净手术室、 ≤10 ≤5 ≤5
洁净病房
Ⅱ类 普通手术室、产房、 ≤200 ≤5 ≤5
婴儿室、普通隔离病房
Ⅲ类 儿科、妇科检查室、 ≤500 ≤10 ≤10
注射、换药、治疗、
急诊、化验、普通病房
Ⅳ类 传染病科及病房 —— ≤15 ≤15
五、为保证医院消毒灭菌可靠，应认真做好医院消毒灭菌效果监测
1、影响消毒灭菌因素很多，使消毒灭菌效果难以保证。
2、消毒灭菌效果生物监测专业性强，条件难创造，结果评价难度大，实验周期长。
3、化学测试试剂法较复杂，结果准确；试纸法简便易行，但精确度较差。
六、压力蒸汽灭菌效果的监测：
（一）BD试纸：
检查灭菌器工艺状态，并不能反应灭菌器使用中被灭菌物品的实际灭菌效果。发现阳性应进行灭菌器性能检查调试。
（二）指示胶带：
表示是否经过灭菌处理，并不能反应被灭菌物品实际灭菌效果。
（三）化学指示卡：
检测每包被灭菌物品的灭菌效果。建议最好每包被灭菌物品中心放一片化学指示卡,待灭菌处理后,视其变色程度（灭菌效果）决定是否使用。
（四）用生物指示剂作系统监测：
采用生物灭菌指示剂来检查压力蒸汽灭菌效果是最科学、最可靠的监测方法。由中国预防医学科学院流行病微生物研究所，北京鑫四环消毒技术开发中心联合产销的嗜热脂肪杆菌芽孢（SS1，K31）是国际公认的标准菌株。现制成标准菌片，供检查压力蒸汽灭菌效果检测。
w 菌株特点：
1、 该菌为需氧芽孢杆菌，细菌繁殖体G兰氏染色阴性呈紫色，细菌芽胞孔雀绿着色。其细菌繁殖体对培养基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上生长良好，表面粗糙呈米黄色。
2、最适生长繁殖温度为56–65℃，培养24h即可形成菌落，37℃下24h看不到菌落。
3、 本生物指示剂载体为高级滤纸片，染菌量为5×105–106cfu/片，封装在小纸袋内，热死亡时间为121℃，3.9min阳性，19min阴性；D10值1.3–1.9min，符合美国药典第十一版规定标准。该菌无毒，热抗稳定，在冰箱内4℃下保存一年抗力无明显下降，在常温（20℃左右）可保存1个月。
w 使用方法：
1、 该芽孢菌片使用时将装有菌片的小纸袋放在被灭菌的物品中心部位（每锅放置菌片数按卫生部规定）。
2、 灭菌后，再无菌操作下取出小纸袋中的菌片， 投放到溴甲酚紫培养液管中。同时将未经灭菌的菌片投入另一管培养基中作对照。
3、 56℃–60℃培养，48h观察结果，对照管为米黄色；若灭菌后菌片培养液颜色不变仍为淡紫色，为阴性（–），表示灭菌彻底；如变黄为阳性（+），表示灭菌不彻底。
w 培养基成分和配制方法：
1、成分：胰蛋白胨10g、葡萄糖5g、蒸馏水 1000ml、1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示剂1ml。
2、配制方法：
（1）1.6g溴甲酚紫溶于98.4ml的96%酒精溶液中摇匀；
（2）把前三种成分溶解后，调解pH7.0-7.2，加入指示剂摇匀；
（3）每管分装5ml，以121℃20min灭菌后，放4℃冰箱内保存，备用。
w 注意事项：
1、防止指示剂中酒精挥发而使溴甲酚紫含量过高（溴甲酚紫含量过高后可抑菌生长）；
2、菌片灭菌后应及时取出培养；
3、禁止菌片接触任何消毒剂及放射源以免影响抗力。
七、化学消毒剂消毒效果监测：
（一）消毒剂有效含量的测试：
1、主要是有效含量不稳定的消毒剂，如过氧 乙酸、含氯消毒剂等应进行含量测试。
2、 化学试剂滴定法较复杂但结果精确；试纸法方便快速，但准确性差。专用测氯试纸——比较准确；复合测试试纸（可同测过氧乙酸、含氯消毒剂）——准确性较差。戊二醛试纸；含碘、臭氧等试纸尚待研究。
（二）化学消毒剂使用溶液污染菌数的检测
1、选好用好中和剂：
2、做到：对应，浓度、比例合适
3、 中和剂选择原则：
①本身对菌无影响
②确能去除杀菌因子
③生成物对菌无影响
④对照完全
★ 试验分组：
① 菌液+药液 培养
②（药+菌液）+中和剂 培养
③ 中和剂+菌液 培养
④（药+中和剂）+菌液 培养
⑤ PBS+菌液 培养
⑥ PBS 培养
⑦ 中和剂 培养
⑧ 培养基 培养
3. 生物安全型灭菌器
I、II、III级生物安全柜、蒸汽内循环自动高压灭菌器、负压通风柜（罩）、消毒喷雾装置、具有生物密封型转头或有负压过滤（高效过滤器）装置的机型、无火焰消毒灭菌灯。
当具潜在危险的物质极有可能溅到工作人员时,应使用塑料围裙或防液体的长罩服。
在这种工作环境中,如必要,还应穿戴其他的个人防护装备,如手套、防护镜、面具、头部面部保护罩等。
4. 灭菌器生物检测
统硕灭菌器时钟故障解除：
1.高压灭菌器由专人负责操作，定期维护和检修。压力表等定期送劳动局指定的压力容器部门校对。
2.高压灭菌器出现故障时，应立即停止使用，并紧急联络设备生产厂商或指定的维修公司。
3.如一时不能修复的，可暂时停止笼具的更换，饲料改用辐照灭菌饲料。
4.长时间不能修复的，笼具更换、清洗后用化学消毒剂浸泡，从缓冲间内喷雾消毒后传入屏障设施内，晾干后使用;其他物品则临时改用辐照灭菌后消毒液喷雾传进屏阵设施内
5. 快速灭菌器
可以先用白醋将洗衣机的内筒擦拭一遍，然后静置半个小时，这时白醋就可以软化洗衣机内筒中的污垢了，也可以把白醋倒在毛巾上，然后将毛巾放入洗衣机中打开甩干模式，这样内筒中就会沾上白醋了。
接着半个小时之后我们在洗衣机中倒入白醋，加入清水，水没过洗衣机洗衣桶的一半以上，不放任何洗涤物品，浸泡3个小时，再启动洗衣开关，冲刷几次，放出洗涤水，再用清水清洗一次，敞开机盖待干即可。
6. 智能灭菌器
有两种办法：
直接用消毒液装入喷雾瓶，对准马桶喷头喷；
2. 把适量的消毒液直接添加到马桶的水箱内，从源头消毒，既可以对马桶水箱消毒，又可以对喷头或者喷头管，喷头消毒。
不过选择消毒液/消毒水的时候要考虑几个因素：1. 消毒液的酸碱度，最好选择中性的 消毒水，如 PH 6.5-7.5；2.选择腐蚀性低的消毒水，以免损伤马桶；3.不伤手，无毒，易分解的消毒水溶液；如surejie中性氧化电位水，PH中性，符合德国及欧盟相关标准。
7. 生物灭菌剂
碘伏属于广谱的生物灭菌剂，在医疗领域以及日常生活中都可以用来灭菌消毒，可以灭杀大部分的细菌、真菌以及病毒。碘伏的灭菌效果很强，尤其是对于细菌繁殖体，可以在很短的时间内就把细菌繁殖体全部灭杀。
碘伏的灭菌效果、灭菌强度是传统消毒剂以及红药水、紫药水等所不能比的。而且碘伏的毒性也比较小，对皮肤的刺激性也比较小。
碘伏对一部分的金属物品有腐蚀作用，所以在使用碘伏浸泡金属物品之前，应该了解碘伏是否腐蚀所浸泡的物品。