1. 干燥箱干热灭菌
1)加热灭菌法
利用高温来杀死微生物(超过最高生长温度)的方法。加热灭菌的原理:当高温作用于微生物时,首先引起细胞内生理生化反应速率加快,机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等,随着温度的增高而遭受不可逆的破坏,尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏,从而使细胞失去了生活机能上的协调,停止了生长发育。随着高温的继续作用,细胞内原生质便发生凝固,酶结构完全破坏,活动消失,生化反应停止,渗透交换等新陈代谢活动消失,细胞死亡。加热灭菌可分干热灭菌和湿热灭菌两大类。
1)干热灭菌 利用灼烧或干热空气灭菌而没有饱和水蒸气参加的灭菌法称为干热灭菌法。由于干热灭菌使用方便,方法简单,故在生产上广泛应用。如火焰灭菌法:直接利用火焰把微生物烧死,故又称焚烧灭菌法。采用此法灭菌既彻底又迅速,但只适用于金属制的接种工具、试管口及污染物品等的处理。热空气灭菌法:即在电热恒温干燥箱中利用干热空气来灭菌。
2)湿热灭菌 即利用蒸汽进行灭菌的方法。湿热灭菌又分为高压、常压、间歇灭菌和巴氏灭菌4种。
2. 干燥箱干热灭菌原理
高温杀菌分为干热灭菌和湿热灭菌两种。
干热灭菌方法 是在干燥条件下加热杀死微生物,如将接种工具在酒精灯火 焰上进行灼烧杀菌,棉花塞在160T烘箱内杀菌等;湿热灭菌 是利用蒸汽产生高温来灭菌,如培养基在高压锅内121T下 灭菌,在常压灭菌灶内100丈左右下灭菌等。
3. 干燥箱干热灭菌的条件一般是
实验室常用的灭菌方法可分为物理方法和化学方法两大类,包括干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法、消毒剂灭菌法、抗生素灭菌法等,玻璃器皿的灭菌方法一般是物理方法,常用的是干热灭菌法和湿热灭菌法两种:
1、干热灭菌
利用恒温干燥箱内120ºC-150ºC的高热,持续90-120分钟,从而杀死细菌和芽孢,用此方法灭菌的物品干燥,易于贮存。除了恒温干燥箱外,酒精灯火焰烧灼灭菌法也属于干热灭菌法的一种,在实验过程中有时会用酒精灯火焰对玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2、湿热灭菌
又称高压蒸汽灭菌法,是用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固、变性而使微生物死亡,一般在高压蒸汽灭菌器内进行,蒸汽压力调整为1.0-1.1kg/cm²,维持20-30分钟即可杀灭细菌。除了高压蒸汽灭菌器,湿热灭菌法还有煮沸灭菌法、巴氏消毒法、流通蒸汽灭菌法及间歇蒸汽灭菌法。
4. 干燥箱干热灭菌法通常在160~170°C下,维持( )
干烤法灭菌:它是利用电热烤箱灭菌,将物品放在密闭烤箱中,利用热空气穿透物体达到消毒灭菌的目的,。一般加热至160~170度,在这个温度下持续2小时,可彻底灭菌,此方法适用于高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品,如玻璃器皿、瓷器.粉剂、软膏等的灭菌。
5. 干热灭菌箱使用方法
(一)电热箱消耗的电流比较大。因此,它所用的电源线、闸刀开关、保险丝、插头、插座等都必须有足够的容量。为了安全,箱壳应接好地线。
(二)对老式电热箱来说,使用时应选择一支合适的水银温度计插入烤箱(或培养箱)顶部排气窗中央的插孔内。以便随时观察箱内的温度。调温旋钮所指的数字,不是箱内温度的实际读数,它只是调温时供记忆的刻度。箱内温度的高低应以温度计的指示为准。
新式电热箱由于其温度显示比较直观,不需要用水银温度计观察。
(三)放入箱内的物品不应过多、过挤。如果被干燥的物品比较湿润,应将排气窗开大。加热时,可开动鼓风机,以便水蒸汽加速排出箱外。但不要让鼓风机长时间连续运转,要注意适当休息。
(四)干燥箱内恒温室下方的散热板上,不能放置物品,以免烤坏物品或引起燃烧。
(五)对玻璃器皿进行高温干热灭菌时,须等箱内温度降低之后,才能开门取出,以免玻璃骤然遇冷而炸裂。
(六)严禁把易燃、易爆、易挥发的物品放入箱内,以免发生事故。
(七)隔水式培养箱,在通电加热以前,必须在水箱内加入足够量的水至浮标指示“止水”标记。为了缩短加热时间,可加比所需温度高约4℃的温水(例如,需要恒温37℃,可加入41℃的温水)。
(八)恒温箱或隔水式培养箱中,凡是使用浸入式电热管的,必须先加水将电热管浸没后才通电。绝对不允许先通电后加水。否则,极易烧坏电热管或损坏电热设备。
(九)如果需要观察恒温室内的物品,可打开外门,隔着内玻璃门进行观察。开门次数不宜过多,以免影响恒温。
6. 干燥箱干热灭菌方法
(1)加热灭菌法
利用高温来杀死微生物(超过最高生长温度)的方法。加热灭菌的原理:当高温作用于微生物时,首先引起细胞内生理生化反应速率加快,机体内对温度敏感的物质如蛋白质、核酸等,随着温度的增高而遭受不可逆的破坏,尽而导致细胞内原生质体的变化、酶结构的破坏,从而使细胞失去了生活机能上的协调,停止了生长发育。随着高温的继续作用,细胞内原生质便发生凝固,酶结构完全破坏,活动消失,生化反应停止,渗透交换等新陈代谢活动消失,细胞死亡。加热灭菌可分干热灭菌和湿热灭菌两大类。
1)干热灭菌 利用灼烧或干热空气灭菌而没有饱和水蒸气参加的灭菌法称为干热灭菌法。由于干热灭菌使用方便,方法简单,故在生产上广泛应用。如火焰灭菌法:直接利用火焰把微生物烧死,故又称焚烧灭菌法。采用此法灭菌既彻底又迅速,但只适用于金属制的接种工具、试管口及污染物品等的处理。热空气灭菌法:即在电热恒温干燥箱中利用干热空气来灭菌。