1. 蛋白质吸光度测量为负值
可见分光光度计吸光度调零时是负值应当在黑暗条件下再重新调零。 分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。
2. 吸光度测蛋白质含量
蛋白质(protein)是组成人体一切细胞、组织的重要成分。蛋白质吸收紫外光能力的大小,主要取决于D、芳香族氨基酸的含量。
在热、酸、碱、重金属盐、紫外线等作用下,蛋白质会发生性质上的改变而凝结起来,这种凝结是不可逆的,不能再使它们恢复成原来的蛋白质。
3. 吸光度测出是负值
我按照浓度由低到高的顺序一次进行测定,在5mg/ml以下的都是正值,大于5mg/ml就变成负值了 出现这种现象是正常的,别管它,只要工作曲线线性好就行,不会影响测试结果的。
bioconnor(站内联系TA)reference 的吸光度大于样品的,就会出现这种情况啊,可以根据吸光度的算法的到啊?xuehuaxue(站内联系TA)如果出现这种情况 建议把样品稀释 后再测量会比较可靠一些yxy113(站内联系TA)如果标线截距很大——小数点后第2位有正值,样品的负值就不正常,需要考虑影响标准系列吸光度的因素。唐小梅(站内联系TA)是不是浓度高了测就不好了呀?
4. 蛋白质吸光度峰值
理论上来说蛋白质浓度越大在紫外光280纳米吸光度就越大,但是任何紫外分光光度计都有量程上限的,超出上限后再提高浓度吸光度也不再发生变化。
另外有些蛋白质因为结构比较特殊,可能在280纳米处吸光度并不敏感,也就是浓度提高很多之后吸光度并无明显的变化也会有可能的。
5. 蛋白质吸光度测量为负值怎么办
用可见分光光度计测吸光度时出现负值的原因很可能是进行了错误的操作方法,或是顺序错误,或是操作错误,或是器皿不够干净等等,都会造成出现负值的后果。 用可见分光光度计测吸光度实验时候必须注意的几点:
1、首先要严格按照实验步骤来,不得少做或者漏做,更不可以打乱顺序做,这样肯定得不好的实验结果的。
2、用于实验的比色皿必须配套使用,这个必须遵守,也许外观看起来都差不多,但是其实配套很重要,无论玻璃比色皿还是石英比色皿,不能混用。
3、必须要保持比色皿的洁净,在每次实验后,一定要清理实验器具,并且在实验过程中,不要用手直接触摸比色皿的透光面,因为这些小动作,往往都会造成实验效果的不好。
4、在放置实验器具的时候,特别是比色皿放置方向,要严格按照实验步骤来放,如果方向错了,那么实验肯定成功不了,所以,比色皿的方向是否正确很重要。
5、在实验过程中,还要时刻关注,拉杆是否到位。
6. 蛋白质的吸光值
不同的鱼100克鱼肉的含蛋白质的含量不同,如黄鱼含17.6%、带鱼含18.1%、鲐鱼含21.4%、鲢鱼含18.6%、鲤鱼含17.3%、鲫鱼含13%。鱼肉所含的蛋白质都是完全蛋白质,而且蛋白质所含必需氨基酸的量和比值最适合人体需要,容易被人体消化吸收。
另外,鱼肉的肌纤维比较短,蛋白质组织结构松散,水分含量比较多,因此,肉质比较鲜嫩,和禽畜肉相比,吃起来更觉软嫩,也更容易消化吸收。所 以,可以看出,鱼类具有高蛋白、低脂肪、维生素、矿物质含量丰富,口味好、易于消化吸收的优点。