动物细胞培养的生物反应器(动物细胞培养生物反应器一般用于进行)

海潮机械 2023-01-16 01:24 编辑:admin 72阅读

1. 动物细胞培养生物反应器一般用于进行

与其他培养相比,动物细胞培养存在一些特殊的地方:

1、培养环境纯净度要求高,动物细胞培养使用超纯水,培养基添加物需要细胞培养级,细胞往往对培养环境比较敏感,过多的杂质会对细胞的代谢产生影响,动物细胞培养往往需要添加血清等营养物质,目前也有很多无血清培养基可以支持细胞的生长和增殖;

2、动物细胞一般是贴壁依赖型生长的,通过驯化可以实现悬浮培养,原代培养的细胞往往是一个不同种类细胞的混合物,通过纯培养得到单一的细胞群,细胞大部分是有限传代的,少量细胞株可以实现转化,无限传代,甚至癌化,所以要避免与人体的接触;

3、动物细胞的扩大培养,因为动物细胞没有细胞壁,对剪切力和渗透压比较敏感,动物细胞的生物反应器,要注意搅拌温和,pH调节时注意体系的渗透压变化。

2. 理想的动物细胞生物反应器必须具备哪些基本要求

  法国巴斯德研究所利用生物反应器进行Vero细胞的大规模培养获得成功以来,生物反应器便以其高密度、大规模、低成本的优势时引起广泛关注。与先进国家相比,我国动物细胞生物反应器方面的技术研究和装备严重滞后,国内用于动物细胞工业化大规模培养生产的人用和兽用疫苗生产技术正处于从转瓶培养向生物反应器悬浮培养技术转型的升级换代初期阶段。

生物反应器是动物细胞工业化大规模培养中的关键设备。生物反应器培养工艺,具有综合成本低、批量大、批间差小、所获得病毒抗原含量高等优点。一些有治疗作用的蛋白组分利用基因工程表达的生物反应器大规模的细胞培养平台的建立意义重大,特别是生物反应器细胞培养技术在生产中的应用,进一步提高了疫苗产品的质量。抗原滴度是疫苗的决定因素,滴度越高预防效果就越好。我国自行生产的疫苗由于生产技术落后,在质量上与国际先进水平存在很大差距,大部分企业的疫苗抗原滴度达不到国家规定要求,只能通过加入佐剂的方法提高免疫效果。添加佐剂后的疫苗,会使接种者产生局部疼痛、硬结等不良反应,特别是使用佐剂导致疫苗产生保护的时间大大滞后,致使很多患者等不及疫苗发挥作用就发病死亡。

生物反应器微载体培养VERO细胞和MARC145细胞,反应器接种细胞后,细胞贴附于微载体迅速生长,经培养后能长满微载体表面,细胞致密、轮廓清晰、形态良好,用结晶紫染色,细胞密度达到5×106个/毫升以上。多以单个细胞形式存在,细胞立体感强、透亮、轮廓清晰、形态良好,细胞密度达到3×106个/毫升以上,用苔盼兰染色,细胞活力在95%以上。通过在生物反应器内投放高密度微载体、使用特殊的培养基和采用独特设计的灌流工艺,生产出了高滴度的抗原。在对引起副反应的杂蛋白、DNA等杂质进行分离后,最终获得达到国际标准的合格无佐剂疫苗。

生物反应器细胞大规模培养技术作为生物制药中最为关键的技术,已成为我国生物技术药物产业化最难跨越的"门槛"。国内的生物制药企业已经感受到需要用反应器进行技术升级的迫切性, 生产技术的创新给疫苗生产企业带来历史发展机遇,同时也带来严峻的挑战。及时准确地掌握和应用不断发展创新的疫苗生产支撑技术将给疫苗生产企业带来持续发展的核心竞争能力。

我们正致力于细胞大规模培养制药工艺技术开发、细胞培养基研发和制造、细胞生物反应器设计和制造,必将推动我国生物制药技术的进步与发展。

3. 动物细胞培养生物反应器的操作模式有哪些

生物技术是利用生物体或其组成部分来生产出有用的物质,继而为人类提供服务的一种技术。伴随着现代生物技术迅猛的发展,细胞工程、基因工程、酶工程、发酵工程得到了一般化工手段难以得到的产品,特别是在解决能源危机、环境污染问题方面,越来越受到人们的关注,并且有的已经实现。

细胞工程是在生物的细胞层面上的操作,包括进行大规模的细胞和组织培养等。通过细胞工程可以生产出有用的生物产品,并且可以产生新的物种。细胞工程有一定的综合性,也就是涉及到多个学科的交叉。在1997年, 克隆羊多莉的诞生标志哺乳动物的体细胞核克隆时代到来,它是由苏格兰罗斯林研究所工作小组培育出来的的,被英国广播公司和科学美国人杂志等媒体称为世界上最著名的动物。多莉没有父亲,但是有三个母亲,一个提供DNA,另一个提供卵细胞,还有一个负责代孕。多莉在2001年时患上了关节炎,后来使用了抗炎药物有所好转,最终在2003年因肺癌死亡。

基因工程又叫作基因拼接技术或DNA重组技术,将来源不同的基因按预先设计,在体外构建杂合的DNA分子,然后将其导入到活细胞中,可以改变生物原有的遗传特性,继而获得新品种。基因工程有跨物种性的特征,可以将外源基因转移到另一种不同的生物细胞内进行繁殖。它打破了物种之间的界限,可以使动物与植物之间,甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组。抗虫棉的研制就属于基因工程的运用,苏云金芽胞杆菌这种细菌可以合成毒蛋白杀死棉铃虫,科学家把细菌的这部分基因导入棉花的细胞中,经过培养就获得了抗虫棉。

酶工程又叫作蛋白质工程学,就是将酶、微生物细胞、动植物细胞、细胞器等置于生物反应装置中,利用酶的催化功能,将相应的原料转化成有用的物质,并将其应用于社会生活的一门技术。具体包括包括酶制剂的制备、酶的固定化、酶的修饰改造等方面。酶工程的应用集中于食品工业、轻工业、医药工业中。在食品工业中可以用来进行淀粉加工,还可以进行乳品加工、果汁加工、烘烤食品,比如淀粉酶、乳糖酶、蛋白酶等。在轻化工业中的用途有洗涤剂制造、化妆品的生产、感光材料生产、废水废物处理等。

发酵工程是采用现代技术手段,利用微生物的某些特定功能,生产有用的产品,或者直接把微生物应用于生产过程的一种技术。发酵工程内容包括菌种选育、配制培养基、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。在医药方面的应用,利用发酵工程开发了很多的药品,比如人类生长激素、重组乙肝疫苗、抗血友病因子等。在食品方面的应用,可以生产传统的发酵产品,如啤酒、食醋等,还可以用来生产食品添加剂,在一定程度上可以帮助解决粮食问题。在环境科学方面的应用,如污水处理中微生物的强化。

4. 动物细胞培养反应器设计关键是

科学家正在研究利用动物做“生产车间”,生产人类所需要的某些物质,这就是生物反应器.利用它的优点是可以节省建设厂房和购买仪器设备的费用,可以减少生产程序和环境污染.乳房生物反应器:将所需目的基因构建入载体(遗传基因),加上适当的调控序列,转入动物胚胎细胞,使转基因动物分泌的乳汁中含有所需要药用蛋白,无论纯化还是使用都很方便,因此动物中最理想的一种生物反应器是“乳房生物反应器”.

5. 采用生物反应器进行细胞培养的关键技术有哪些?

目前上市的重组抗体中绝大多数(如:Enbrel、Herceptin、Rituxan、Synagis)是采用流加(Fed-batch)培养工艺生产,这主要由于与之配套的生物反应器(搅拌罐、气升罐等)制造成熟,可线形放大(最大至20,000L),操作简单等原因。但是,流加培养过程中会出现营养物质消耗、代谢废物积累,以及产品质量不稳定等问题。因此,流加培养工艺的优化主要集中在基础培养基、流加培养基以及流加策略上,其优化的原则是根据细胞的代谢特点设计补料培养基,用于补充易耗成分,降低副产物积累。

作为生物大分子的重组抗体,同时具备聚体、降解、糖基化修饰、氧化、脱酰基化、异构体、二硫键错配等多种变异形式。由“细胞工厂”异源表达的重组抗体,其绝大部分质量变异与生产细胞对重组蛋白的翻译后修饰作用直接相关。

6. 动物细胞培养生物反应器一般用于进行什么培养

这个需要根据你的实验目的。

如果只是为了扩增细胞数量,大部分细胞翻倍时间大致是24h左右。

如果是为了做蛋白表达,从转染算起,3-11天都是可以的。

动物细胞无细胞壁,多数动物细胞需附着在固体或半固体表面才能生长;动物细胞培养除了需要与微生物、植物细胞一样的培养基成分外,还需要血清成分,特别需要动物激素的存在;动物细胞培养对环境更敏感,培养条件的控制更为严格;反应器要适应无菌状态高密度、长时间培养。