1. 菌落快速检测仪器
常用仪器：灭菌锅、恒温培养箱、鼓风干燥箱，冰箱，电子天平，均质器，菌落计数器，PH计，显微镜，超净工作台。产品名称无菌吸管、锥形瓶、玻璃培养皿、pH试纸、试管、烧杯、量筒、试管刷、洗耳球、试管架、均质袋、移液器，酒精灯、接种环。
2. 菌落的检测
采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露于空气中0.5h，再将培养皿盖上盖后倒置放置。
培养、计数：采样结束，将培养皿倒置于恒温培养箱中30～35℃培养48±2h，肉眼直接计数。每批可选定2只培养皿作对照培养。计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并必须注意细菌菌落与培养基沉淀物、气泡的区别，必要时用放大镜鉴别。
3. 菌类检测仪器
一、仪器的架设
1、打开三脚架及仪器盒,将脚架大致安平,将基准站和天线安装好,然后插线,天线带的线头插在电台下面(螺旋),将电瓶带的线头,单线头插在基准站蘑菇头下部(红点对准),将双线插在电台上端插口(红点对准),检查线头插接无误时,再将夹子夹在电瓶的两极(红色夹正极,蓝色插负极),检查无误后依次打开电台和基准站的电源。
二、仪器的连接与设置
1、打开
1、新建任务(如202160308),选择重庆80坐标系统;
2、保存任务;
3、打开新建的任务20210308;
4、在文件中查看任务属性、当前坐标参数(取消“水平平差、垂直平差”的“√”;
5、在配置下找到手薄端口设置,打开选择蓝牙连接,先绑定基准站(#### ##61);
6、测量下打开开启基准站接收机,进入界面后,在右下角点击断开;返回后在测量下再一次打开开启基准站接收机进行设置,输入点号(如1),用卷尺测量地面到基准站蘑菇头下沿的高度,在天线高度一栏填写测量的高度(如1.60),选择天线底部,然后点击“此处”,然后点击下一步(不用修改如何设置),在然后确定,完成基准站连接;
7、在配置下找到手薄端口设置,打开选择蓝牙连接,绑定移动站(##### #41);
8、测量下打开开启移动站接收机,进入界面后,在右下角点击断开;返回后在
测量下再一次打开开启移动站接收机进行设置,按电台上面最上面的按钮打开通道,在手薄上选择的通道和电台打开的通道保持一致,然后下一步、下一步,完成移动站的连接。
三、点校正
1、在测量下打开测量点界面(地形点)将已知点的两点坐标进行测量(如A1、A2),在测量之前观察界面中的天线高度与移动站的天线高度是否保持一致,如果不一致就先将其调整成一致在进行测量;在键入下键入已知点坐标X、Y、H(注意将点号与原来测量的点号区分开,如JA1、JA2);
2、在测量下最后一行找到“点校正”,打开点校正,点击左下角的增加,进入界面后点击第一行“...”,选择A1,再点击第三行”...”,选择JA1,点击右下角的确定,再选择增加,进入界面后点击第一行“...”,选择A2,再点击第三行”...”,选择JA2,然后点击“计算”,计算后选择确定、是,返回主界面;
3、在测量下打开测量点界面,测量(注意区分点号如A01)已知点A1或者A2,然后在文件下找到点管理器,打开点管理器,查看A01坐标与已知点A1坐标进行比较,点校正完成。
四、注意事项
1、测量完成后收拾仪器时,先将基准站、移动站、电台关机,再拔下电源线;
2、收拾仪器时检查是否将所有部件装箱;
3、测量回来后将仪器的电池进行充电,将有电的电池不要装在仪器内;
4、及时将数据在手薄上导出。
4. 菌落检测方法
常用的检测方法有培养法、荧光染色法、PCR法和电镜观察法。
培养法是最为可靠且成本低廉的方法,但培养周期较长,常用于细胞以及临床治疗细胞的支原体检査;
荧光染色法是用特异荧光染料(Hoechst 33258)染色后在荧光显微镜下进行检测,荧光染料(Hoechst 33258)是一种能和DNA特异结合物质,如果检测样品为支原体污染,则附在细胞表面和分散在细胞与细胞之间的支原体DNA着色,在荧光显微镜下可见;
PCR法检测是通过对支原体特定的序列设计引物,当存在支原体污染时通过PCR特异性扩增,会将目标DNA特异性的复制,然后通过琼脂糖电泳观检测,会跑出条带出现阳性结果,反之当没有支原体污染时,由于没有模板,PCR无法扩增,则琼脂糖电泳跑不出条带,出现阴性结果;电镜观察法是利用电子显微镜的超级放大功能,直接观察培养细胞中支原体污染情况。
在此主要介绍利用荧光染色法来检测培养细胞中的支原体,具体检测步骤如下:
(1)细胞爬片培养:待测细胞培养至传代水平,将细胞消化后接种至含有玻片的细胞板中,培养至60%-70%汇合时,进行检测;
(2)漂洗:将细胞板中的培养液吸出,取出玻片,用PBS轻轻漂洗;
(3)固定:加入适量的固定液,室温放置10min;
(4)漂洗:用PBS轻轻漂洗3次;
(5)染色:加入适量的荧光染料(Hoechst 33258)工作液,在室温下放置10min;
(6)漂洗:用PBS轻轻漂洗3次;
(7)镜下观察:将玻片晾干后,滴加抗荧光猝灭剂,于荧光显微镜下观察、拍照;
5. 菌落鉴定仪
一、理化分析仪器
1、色谱分析
1）气相色谱仪
2）液相色谱仪
3）凝胶色谱仪
4）离子色谱仪
5）质谱仪
6）薄层色谱仪
7）毛细管电泳
8）其他
2、光谱分析
1）可见分光光度计
2）紫外可见分光光度计
3）近红外分光光度计
4）红外分光光度计
5）原子吸收分光光度计
6）原子荧光分光光度计
7）荧光分光光度计
8）光声分光光度计
9）光电直读光谱仪
10）ICP光谱仪
11）MPT光谱仪
12）激光光谱仪
13）拉曼分光光度计
14）光谱成像仪
15）旋光仪
16）色度仪
17）其他
3、电化学分析产品
1）电导分析/PH分析
2）电位分析
3）电解库仑分析
4）极谱伏安分析
5）流动注射分析仪
6）滴定仪
7）电泳仪
8）COD
9）BOD
10）其他
二、生化分析仪器
1、分子生物学类仪器
1）PCR仪
2）电泳仪
3）凝胶成像系统
4）酶标仪/洗板机
2、细胞生物学类仪器
1）显微镜
2）高压破碎仪
3）超声波破碎仪
4）多参数生化分析仪
3、微生物学类仪器
1）菌落计数器
2）全自动微生物鉴定仪
4、通用生物实验仪器
1）高压灭菌器
2）离心机
3）移液器
4）培养箱
三、物化分析仪器
1、粘度计
2、熔点仪
3、密度计
四、常规实验仪器
1、干燥箱
2、电炉
3、低温冰箱/保存箱
4、摇床（振荡器）
5、灭菌器
6、恒温水浴/油浴
7、超净工作台
8、培养箱
五、专用分析仪器
1、水质专用分析仪
2、药物专用分析仪
1）崩解仪
2）药物溶出度仪
3）片剂硬度计
4）澄明度测定仪
5）热源测温仪
6）脆碎度仪
3、环保专用仪器
1）声级计
2）照度计
3）大气采样器
4）辐射仪
4、食品专用仪器
1）粗脂肪测定仪
2）定氮仪
3）粗纤维测定仪
4）黄曲霉素测定仪
六、样品处理设备
1、微波消解
2、旋转蒸发仪
3、固相萃取/固相微萃取
4、快速溶剂萃取仪
5、GPC凝胶渗透仪