1. 超微量分光光度计校准规范
开721-A分光光度计的开关,将比色池的盖子打开,通电20分钟使仪器预热。将波长旋至测定的波长。
将空白液、校准液或待测液放入比色池,将空白液置于光路中。
将开关置于T位,打开比色池盖子,用光量粗调和光量细调调节T为0.0,关上比色池盖子,调节T为100.0.将开关置于A,用消光调零调节A为0.0.重复步骤4和5.
2. 超微量分光光度计测DNA浓度
1、超微量分光光度计测260nm吸收值计算。
可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。
2、也可以用RNA胶(凝胶成像)检测。例如:原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。在胶上就有三条明显大小不一的条带。凝胶迁移分析。可以用来研究RNA-蛋白相互作用。基本原理是:结合了蛋白的RNA在凝胶中的迁移速率更慢,因而可以区分出结合蛋白与未结合蛋白的RNA条带。
3. 超微量分光光度计检定规程
一般来说,用紫外分光光度计来检测,都是测的微量或痕量离一的含量,一般其测定需要借助显色剂或退色剂。测定时首先需要配标准溶液,然后测待测样品,得到的吸光度值在标准曲线上查找得到对用的浓度。
监测的时侯,一般需要先校正光度计,然后用空白走基线,然后才开始测定。
4. 超微量分光光度计NanoDrop One
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop
3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
5. 超微量分光光度计测蛋白浓度
计
分光光度计是用不连续的波长采样反射物体或透射物体的一种测量仪器。由于不同物体分子的结构不同,对不同波长光线的吸收能力也不同,因此,每种物体都具有特定的吸收光谱。能从含有各种波长的混合光中,将每一种单色光分离出来,并测量其强度的仪器叫做分光光度计。
分光光度法是比色法的发展。比色法只限于在可见光区,分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。分光光度法则要求近于真正单色光,其光谱带宽最大不超过3-5nm,在紫外区可到1nm以下,来自棱镜或光栅,具有较高的精度。分光光度计?就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。分光光度计可分为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。
分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。