检测蛋白质的设备(蛋白质测定装置)

海潮机械 2023-01-17 20:36 编辑:admin 282阅读

1. 蛋白质测定装置

膜运输蛋白(membrane transport protein)也叫膜整合蛋白。或是大的跨膜分子复合物,一种不同的运输蛋白机制。功能是参与被动运输(促进扩散)或主动运输(运输泵)。

2. 蛋白质测定装置原理

主要根据的原理是生物电阻抗测量原理,当人站在体重秤的时候,上面会有电极片通过电流来检测体内脂肪,蛋白以及碳水化合物含量,脂肪是不导电的,通过闭合回路里面电流的大小判断脂肪多少,同时还会根据患者的年龄,身高,体重等来综合分析出体脂,除此之外还可以测量基础代谢率,身体水分及骨量。

3. 蛋白质测定试剂

蛋白质的检测

(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)

(2)步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应,蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。在碱性溶液中蛋白质与Cu2+形成紫红色络合物,其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比,而与蛋白质的分子量氨基酸成分无关,因此可用比色法测定蛋白质含量。在一定条件下,未知样品的溶液与标准蛋白质溶液同时反应,并于540~560nm下比色,可以通过标准蛋白质的标准曲线求出未知的蛋白质浓度。

4. 蛋白质测定法

如果你手上有比较大量的纯度比较高的蛋白质的话。可以尝试用以下比较直接的方法:

1. isothermal titration calorimetry (ITC),直接测定两个蛋白互相作用的Kd值。

2. AUC,也就是超速离心分析。可以直接测定两个蛋白相互作用与否。

3.SAXS, 也就是X-ray小角散乱。不过技术难度比较大一些。

4. 溶液NMR,这个应该可以但不太了解。

5. 结晶再解构,这个不用解释了。比较究极一点。

6.cryo-EM,同上。比较究级的方法。

7. 最简单常用的,gel-filtration,观察有没有oligomer的分子量峰出现。但是相互作用弱的话很难观测到。

8.更简单常用的nativePAGE,同上,相互作用弱则很难观测到。

9.用氨基架桥试剂共价连接,然后SDS-PAGE。看看有没有oligomer的带。暂时想到这些,跨度比较大。

5. 蛋白质测定仪器

血氧仪跟其他医疗设备一样,质量有好有差,价格有高有低,购买价约在100元至800元之间。

血氧饱和仪,简称血氧仪,是一种以非侵入的方法测量人体血氧饱和度的仪器,通过在特定体表位置探测红光及红外光线被吸收的情况,计算氧合血红蛋白和还原血红蛋白的差距而得出身体血氧饱和度的估值。

6. 蛋白质测定装置图

对角线电泳是一种经典的二硫键定位分析方法.这种技术包括:(1)胃蛋白酶酶切未经还原的蛋白质;(2)在酸性pH=6.5的条件下进行第一向电泳,酶解产物肽段将按其大小及电荷的不同而分离;(3)将滤纸暴露在过甲酸(CHOOOH)蒸气中,使二硫键氧化断裂,并进一步氧 化成磺酸基,被氧化的半胱氨酸称为磺基 丙氨酸;(4)将滤纸旋转90.角,在与第一向完全相同的条件下进行第二向电泳.无二硫键的肽不受酸的作用而在两向电泳中迁移率相等,将位于一条对角线上.那些含二硫键的肽由于第二向电泳时被酸氧化,肽段大小和负电荷发生变化而使迁移率不同,将偏离对角线.肽斑可通过茚三酮显色来确定.将含磺基丙氨酸的肽段分别取下,进行氨基酸序列分析,推断二硫键的位置.如果蛋白质中存在其他未成二硫键的半胱氨酸,要先用碘乙酰胺封闭其一SH后再酶解.此外甲硫氨酸和色氨酸也能被氧化,这样可能会增加分析的复杂性.

7. 蛋白质测定所需要的仪器与设备

蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化,从而改变这些染料的光吸收。

在些基础上发展了蛋白质染色测定方法。涉及的指示剂有甲基橙、考马斯亮蓝、溴甲酚绿和溴甲酚紫。目前广泛使用的染料是考马斯亮蓝。考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质通过范德华键结合后,变为蓝色,且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律,可在595nm处比色测定。2—5分钟即呈最大光吸收,至少稳定1小时。在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内均可。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、丙酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。缓冲液浓度过高时,改变测定液pH值会影响显色。考马斯亮蓝染色能力强,比色杯不洗干净会影响光吸收值,不可用石英怀测定

8. 蛋白质测定仪

蛋白质检测仪【恒美HM-Z12】能够检测乳制品中的蛋白质。食品中的蛋白质含量在一定程度上代表了食品的营养价值,如今市面上很多食品配料与实际情况并不符,很多食品用其他物质来代替蛋白质,从而降低了食品的营养价值。像奶粉等乳制品蛋白质含量就会较高,乳制品中的蛋白质是严格按照一定的配方比例生产的,所以用蛋白质检测仪测量乳制品中蛋白质含量具有重要意义。

如今随着食品行业的发展,乳品工业已经成功进阶为食品工业的重要组成部分。乳制品的加工销售量也得到了很多人的追捧。但是乳制品商家众多,很多人并不会按照国标来生产,所以这些乳制品中的蛋白质并不达标,很多婴儿吃了这样的乳制品会严重影响身体生长发育,甚至有些孩子出现了大头症等症状。蛋白质检测仪【恒美HM-Z12】可以快速的检测食品中的蛋白质含量,确定乳制品是否合标。