1. 分光光度计波长校正
紫外分光光度计扫描,从大波长到低波长,最大吸收峰都会标注出来,可以选择一个各个峰吸收值都较大的波长做高效液相。
2. 分光光度计波长校正错误
分光光度计波长不准确是会影响吸光度的误差。由于吸光度的误差,而最终是造成测定数据结果的误差。
3. 分光光度计波长校正的意义
一般物质在不同波长下的吸光度是不一样的,即使水也是如此.所以用作空白的溶液在A波长下调零后到B波长下可能就不是零了,所以是需要重新调零的. 光的波长与光能的关系:E=C/λ,即:光速与光波之比=光能,波长不同,光能不同,分光光度计调零、调满度的目的就是要用所需测试波长的光能作基准对照。
4. 分光光度计波长校正错误怎么回事
如果测定波长是在紫外区波长范围的需要用紫外分光光度计去检测,分光光度计是检测不出来值的。
5. 分光光度计波长校准
1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。
2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较高档。)
3.根据所需波长转动波长选择钮。
4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。
5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘示数t=0。
6.盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。
7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
6. 分光光度计波长校正后纯水不透光
比色皿配对比较麻烦,一般在分光光度法测定时采用比色皿误差测定后进行样品的测定。
1、比色皿配对
样品溶液先配成吸收度在0.6~0.8之间的浓度测定,然后用同批溶剂将溶液稀释一倍,再测吸收度。
从供试品溶液的配制起,平行操作两次,并注明测定时的温度。
同一台仪器测定所得二份结果间的偏差应不超过l%。当结果符合要求后,对各台仪器测得的平均值进行统计,若相对标准偏差不超过1.5%,则以测得的平均值为相应药物的吸收系数。
现行的国家检定规程中规定配对的两只比色皿间差值不得超过±0.5%。因为在可见光区,玻璃比色皿和石英比色皿都可以使用,所以可利用每对比色皿间的透光率直接进行比较。
使用4对比色皿,在波长500nm 下,以空气和纯水为介质,使用透光率T 进行测量,将每组比色皿中的一只透射率调为100%,测量另外一只透光率,凡透射率之差不大于5% ( △T = 0.005 =0.5%) ,即可配对使用。
2、比色皿误差测定与样品测定
2.1、任意取用2只清洁比色皿。
2.2、2只比色皿中加入相同的空白溶液。
2.3、以其中的任何一只比色皿为空白皿,调节仪器的吸收度为0;
2.4、测定另一只比色皿的吸收度,测得值为A0。用此比色皿测定样品,仪器的显示值为A,则样品的真实测得值A样=A-A0
7. 分光光度计波长校正错误应该怎么办
操作步骤:
(1)开机后将波长设定为580nm,打开试样室盖,用一张名片大小的白纸贴在样品室左侧正中央,此时可看到一个长方形的黄色光斑(完后将白纸拿掉)。
(2)将仪器设置为T档,波长设定为520nm,样品为空白,打开试样室盖,按▽/0%键使数显为000.0,然后关闭试样室盖,按△/100%键使数显为100.0。
(3)将镨汝滤光片作为被测样品放入试样室,依次调波长520nm, 522nm, 524nm, 526nm, 528nm, 530nm, 534nm, 536nm,逐点读出并记录各自所测得的T%值,