1. 分光光度计配件
分光光度计原理:
分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
分光光度计组成:主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。
分光光度定义:
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。
常用的波长范围:
(1)200~400nm的紫外光区
(2)400~760nm的可见光区
(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区
所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。
分光光度计的重要配件—— 比色杯
比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定。因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。
分光光度计操作方法:
1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。
2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较)。
3.根据所需波长转动波长选择钮。
4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。
5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。
6.盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。
7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。
2. 分光光度计厂家及型号
721型可见分光光度计 是棱镜做分光元件,波长范围小,波长精度较低,微安表读数的最普通的实验室光谱分析仪器。
722型可见分光光度计采用光栅做分光元件,波长精度较高,数码读数,属中档型。
723型可见光分光光度计采用光栅做分光元件,波长精度高、cpu处理数据、自动打印等,属高档型。
751型分光光度计属紫外、可见分光光度计。
3. 分光光度计部件
紫外-可见分光光度计由5个部件组成: ①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱,如钨灯、卤钨灯(波长范围350~2500纳米),氘灯或氢灯(180~460纳米),或可调谐染料激光光源等。 ②单色器 。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件(棱镜或光栅)组成,是用以产生高纯度单色光束的装置,其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。 ③试样容器,又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用,分为石英池和玻璃池两种,前者适用于紫外到可见区,后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5~10厘米。 ④检测器,又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管,后者较前者更灵敏,特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器,具有快速扫描的特点。 ⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计,常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等,可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
4. 分光光度计配件有哪些
似乎问题有点模糊、应该是双光束分光光度计的机构:
1光源、一般是钨丝灯;2双光路光路系统;
3分光器;
4光电检测器(光电池、光电管等);
5显示器及信号处理!
5. 分光光度计 光源
紫外-可见分光光度计由5个部件组成:
①辐射源。
必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱,如钨灯、卤钨灯(波长范围350~2500纳米),氘灯或氢灯(180~460纳米),或可调谐染料激光光源等。
②单色器。
它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件(棱镜或光栅)组成,是用以产生高纯度单色光束的装置,其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
③试样容器,又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用,分为石英池和玻璃池两种,前者适用于紫外到可见区,后者只适用于可见区。
容器的光程一般为0.5~10厘米。
④检测器,又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管,后者较前者更灵敏,特别适用于检测较弱的辐射。
近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器,具有快速扫描的特点。
⑤显示装置。
这部分装置发展较快。较高级的光度计,常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等,可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
6. 分光光度计的部件及作用
可见分光光度计的作用,主要是测定有色溶液中测定物质的吸光度。
具体应用是使用在:依据朗伯比尔定律(A=kbc)测定物质的吸光度A值,进行定量的目的。
可见分光光度计是有光源(钨丝灯发出连续光谱)、比色皿(装有色溶液)、单色器(给出单色光)、检测器(读出吸光度值)。
7. 分光光度计配套
在原子吸收分光光度计上使用的光源一般有:
空心阴极灯(hollow cathode lamp,HCL)、无极放电灯、蒸气放电灯和激光光 源灯。其中应用最广泛的是空心阴极灯和无极放电灯。
光源的作用是发射待测元素的特征光谱,供测量用。为了保证峰值吸收的测量, 要求光源必须能发射出比吸收线宽度更窄的锐线光谱,并且强度大而稳定,背景低且 噪声小,使用寿命长。
空心阴极灯又称元素灯,根据阴极材料的不同, 分为单元素灯和多元素灯。通常单元素的空心阴极 灯只能用于一种元素的测定,这类灯发射线干扰 少、强度高、但每测一种元素需要更换一种灯。多 元素灯可连续测定几种元素,减少了换灯的麻烦, 但光强度较弱,容易产生干扰。目前我国生产的空 心阴极灯可以满足国内外各种型号的原子吸收分 光光度计的要求,元素品种达 60 余种。
空心阴极灯使用前应经过一段预热时间,使灯的发光强度达到稳定。预热时间随 灯元素的不同而不同,一般在 20min~30min 以上。使用时,应选择合适的工作电流。
无极放电灯又称微波激发无极放电灯。无极放电灯的发射强度比空心阴极灯大 100~1000 倍。谱线半宽度很窄,适用于对难激发的 As、Se、Sn 等元素的测定。目 前已制成 Al、P、K、Rb、Zn、Cd、Hg、Sn、Pb、As 等 18 种元素的商品无极放电灯。
8. 分光光度计组成部件有哪些
原子吸收光谱仪的结构均由五部分组成,分别为激发光源、原子化器、单色器、检测与控制系统、数据处理系统,此外还有仪器背景校正系统.
原子吸收光谱分析(又称原子吸收分光光度分析)是基于从光源辐射出待测元素的特征光波,通过样品的蒸汽时,被蒸汽中待测元素的基态原子所吸收,由辐射光波强度减弱的程度,可以求出样品中待测元素的含量