自动分光光度计(简易分光光度计)

海潮机械 2023-01-14 19:56 编辑:admin 266阅读

1. 简易分光光度计

紫外可见分光光度计可广泛应用于供水、环保、疾控、大气、第三方检测、化工、工业、质检、科研院校等行业,是分析试验领域中理想的质量检测仪器之一,是常规实验室的必备仪器。

  一、开机

  1、打开紫外可见分光光度计开关,紫外可见分光光度计使用前应预热30分钟。

  2、转动波长旋钮,观察波长显示窗,调整至需要的测量波长。

  3、根据测量波长,拨动光源切换杆,手动切换光源。200-339nm使用氘灯,切换杆拨至紫外区;340nm-1000nm使用卤钨灯,切换杆拨至可见区。紫外可见分光光度计无需手动切换灯源,波长在370nm处自动切换。

  二、调零

  1、调T零

  在透视比(T)模式,将遮光体放入样品架,合上样品室盖,拉动样品架拉杆使其进入光路。按下“调0%”键,屏幕上显示“000.0”或“-000.0”时,调T零完成。

  2、调1**%T/OA

  先用参比(空白)溶液荡洗比色皿2-3次,将参比(空白)溶液倒入比色皿,溶液量约为比色皿高度的3/4,用擦镜纸将透光面擦拭干净,按一定的方向,将比色皿放入样品架。合上样品室盖,拉动样品架拉杆使其进入光路。按下“调1**%”键,屏幕上显示“BL”延时数秒便出现“100.0”(T模式)或“000.0”、“-000.0”(A模式)。调1**%T/OA完成。

  三、测量

  1、测量吸光度

  ①调T零。

  ②在吸光度(A)模式,调1**%T/OA。

  ③用待测溶液荡洗比色皿2-3次,将待测溶液倒入比色皿,溶液量约为比色皿高度的3/4,用擦镜纸将透光面擦拭干净,按一定的方向,将比色皿放入样品架。合上样品室盖,拉动样品架拉杆使其进入光路,读取测量数据。

  2、测量透视比

  ①调T零。

  ②在透视比(T)模式,调1**%T/OA。

  ③用待测溶液荡洗比色皿2-3次,将待测溶液倒入比色皿,溶液量约为比色皿高度的3/4,用擦镜纸将透光面擦拭干净,按一定的方向,将比色皿放入样品架。合上样品室盖,拉动样品架拉杆使其进入光路,读取测量数据。

  3、浓度测量

  ①调T零。

  ②在透视比(T)模式,调1**%T/OA。

  ③用标准浓度溶液荡洗比色皿2-3次,将标准浓度溶液倒入比色皿,溶液量约为比色皿高度的3/4,用擦镜纸将透光面擦拭干净,按一定的方向,将比色皿放入样品架。合上样品室盖,拉动样品架拉杆使其进入光路。

  ④按下“功能键”切换至浓度(C)模式。

  ⑤按下“▲”或“▼”键,设置标准溶液浓度,并按下“确认”键。

  ⑥用待测溶液荡洗比色皿2-3次,将待测溶液倒入比色皿,溶液量约为比色皿高度的3/4,用擦镜纸将透光面擦拭干净,按一定的方向,将比色皿放入样品架。合上样品室盖,拉动样品架拉杆使其进入光路,读取测量数据。

  4、斜率测量

  ①调T零。

  ②在透视比(T)模式,调1**%T/OA。

  ③按下“功能键”切换至斜率(F)模式。

  ④按下“▲”或“▼”键,设置样品斜率。

  ⑤用待测溶液荡洗比色皿2-3次,将待测溶液倒入比色皿,溶液量约为比色皿高度的3/4,用擦镜纸将透光面擦拭干净,按一定的方向,将比色皿放入样品架。合上样品室盖,拉动样品架拉杆使其进入光路,按下“确认”键(此时紫外可见分光光度计自动切换至浓度(C)模式),读取测量数据。

  四、测量完毕

  1、测量完毕后,清理样品室,将比色皿清洗干净,倒置晾干后收起。

  2、关闭电源,盖好防尘罩,结束试验。

  五、仪器的维护

  1、为确保紫外可见分光光度计稳定工作,在电源电压波动较大的地方,建议用户使用交流稳定电压。

  2、当紫外可见分光光度计停止工作时,应关闭电源开关,切断电源。

  3、每次使用结束后,应仔细检查样品室内是否有溶液溢出,必须随时用滤纸吸干。

  4、停止工作时,请用防尘罩罩住紫外可见分光光度计,并在罩内放置防潮剂,以免仪器积灰,玷污和受潮。

  5、清洁紫外可见分光光度计前,应线切断电源,拔断电源线。

  6、使用沾水的软布擦拭紫外可见分光光度计外壳,切勿用有机溶剂。

  7、经常检查紫外可见分光光度计背部散热孔,风扇,保持通畅。

  8、钨卤素灯有使用寿命,使用较长时间后,会变暗,烧毁,必须更换。

  六、注意事项

  1、调1**%T/OA后,紫外可见分光光度计应稳定5分钟再进行测量。

  2、光源选择不正确或光源切换杆不到位,将直接影响紫外可见分光光度计的稳定性。

  3、比色皿应配对使用,不得混用。置入样品架时,石英比色皿上端的“Q”标记(或箭头)、玻璃比色皿上端的“G”标记方向应一致。

  4、玻璃比色皿适用范围:320nm~1100nm,石英比色皿适用范围:200nm~1100nm。

2. 普通分光光度计

分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。

钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。

3. 分光光度计的分光系统

分光光度计介绍:

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。该仪器是食品厂、饮用水厂办理QS、HACCP认证的必备检验设备。

分光光度计原理:

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

分光光度计组成:主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

分光光度定义:

分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。

常用的波长范围:

(1)200~400nm的紫外光区

(2)400~760nm的可见光区

(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区

所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。

分光光度计的重要配件—— 比色杯

比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定。因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。

分光光度计操作方法:

1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。

2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较)。

3.根据所需波长转动波长选择钮。

4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。

6.盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。

7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。

分光光度计注意事项:

1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。

3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

4. 简易分光光度计使用方法

1、机器开关在机器的右侧,按一下就会打开,有个小的屏幕,可以按数字键来操作选项,测吸光值操作。

2、按数字键1,进入选项,有当前参数、吸光度等

3、点击键盘上的GOTO键去设置,一般设置为600,输入直接按数字键就可以。输入之后按ENTER这个键,这个是确认键。

4、把样品放到比色皿里面,留一个比色皿方蒸馏水,将蒸馏水的比色皿放到第一个其余的依次放入

5、盖上一起的盖子,拉环的位置正处于测定第一个比色皿的位置,这一步需要归零,按键盘上的ZREO键。

6、归零之后,开始依次用力拖动把手,显示屏上就会显示出对应的吸光度,依次纪录数值,就能完成测定吸光值的实验

5. 光电分光光度计

分光光度计的应用原理:是采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度,样品的吸光值与样品的浓度成正比。

6. 分光光度计光度方式

分光光度计的原理就是:光源---比色池---接收器.光源发光,通过比色池,比色池里液体吸收部分光,再有部分光透过比色池,进入接收器.液体浓度越高,吸收越大,反应在接收器就是接收光量减少,专业里用吸光度表示.最终,建立吸光度和浓度的关系,也就是琅勃-比尔定律.该定律就是针对单波段光定义的.因此这个需要用单色光.通常单色光是选择它的最大吸收峰处,这样有最高的灵敏度和准确度.因为这样的话,液体浓度和光信号的关系灵敏.如果选择非最大吸收峰的话,原理上也能讲通,但是在灵敏度就不如最大吸收峰处的波长