1. 分光光度计特点
分光光度计使用经验总结
1.坚持标准溶液现用现配,不使用过期标准液。使用仪器之前,一般要校正仪器,看看空白时透光率是否是99.99%。
2.比色皿应该保持清洁,干燥。如有污物,可用稀盐酸清洗后,再用1:1的酒精与乙醚清洗凉干。禁止用硬物碰或擦透明表面。或者建议使用10%的盐酸溶液浸泡,然后用无水乙醇冲洗2~3次。比色皿具有方向性,使用时要注意,仔细观察比色皿上方应该有一个箭头标志的,代表入射光方向。注入和倒出溶液时,应该选择非透光面。好使用配对的比色皿。
3.防止仪器振动,影响光学系统。
4.在开机状态,不测量时,应该打开样品池门,否则,影响光电传感器寿命。
5.样品集中测量,避免开机次数,可延长光源寿命。
6.仪器工作稳定性差,漂移大时,应该考虑 换光源或光电元件。
7. 一般分光仪主要有光源部分、光路部分、检测器三的部分,光路有的情况是稳压电源问题,钨灯问题及钨灯位置与光路不一致等问题。光路部分主要有比色皿不干净,灯光与比色皿位置不合适(在正常情况下,比色皿位置放一张白纸,可以清楚看到光斑形状呈显矩形,属于正常情况。对于检测器大多数是正常的,但是光敏管或者光电管有时侯也会出现问题。
8.若峰出现很多“毛刺”,可能是扫描速度过快,浓度过高或者狭缝过小;
9. 紫外分光光度计用来测紫外光时,石英皿用来调零时不稳定,是由那些原因?shouxian确定是否用成玻璃比色皿,判断方法在紫外区任一波长下用空气调零测比色皿的吸光度如果超过1ABS则比色皿用错.再次用空气调零看零点是否稳定,如不稳则是仪器问题,如空气稳定而放入石英皿后不稳定,则检查是否空白溶液吸光度太高,是否空白溶液药品过期,或者空白溶液透明范围不适合此波长测量比如甲醇在210NM以下吸光度很大无法调零。
10. 仪器狭缝宽度的选择
狭缝的宽度会直接影响到测定的灵敏度和校准曲线的线性范围。狭缝宽度过大时,入射光的单色光降低,校准曲线偏离比耳定律,灵敏度降低;狭缝宽度过窄时,光强变弱,势bi要提高仪器的增益,随之而来的是仪器噪声增大,于测量不利。选择狭缝宽度的方法是:测量吸光度随狭缝宽度的变化。狭缝的宽度在一个范围内,吸光度是不变的,当狭缝宽度大到某一程度时,吸光度开始减小。因此,在不减小吸光度时的大狭缝宽度,即是所欲选取的合适的狭缝宽度。
11. 紫外测量吸光度值不准,什么原因,请指教
(1).仪器调零后跳动大的话那可能是仪器有问题.
(2).调零稳定的话,看样品浓度是否过高,好控制在0-1个吸光度之间.
(3).浓度合适的话,看是否比色皿没擦干净,一般可用蒸馏水冲洗一下,擦干后用镜头纸擦干净.
(4).检查样品是否稳定,如果零点不变而放上样品变化,那么是样品有变化,检查样品是否有问题.
12.关于仪器维护
(1).仪器工作电源一般为220V,允许10%的电压波动.
(2).为了延长光源使用寿命,在不使时不要开光源灯.
(3).单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内不能拆开,为防止色散元件受潮发霉,bi须经常
换蛋色器盒干燥剂.
(4).bi须正确使用吸收池,保护吸收池光学面.
(5).光电转换元件不能长时间暴光,应避免强光照射或受潮积尘.
2. 分光光度计的性能
OD值。
OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,是检测方法里的专有名词,检测单位用OD值表示,OD=lg(1/trans),其中trans为检测物的透光值。
光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。
3. 分光光度计种类
Tx和Abs分别没有单位,T代表透光率,Abs代表吸光度,他们都没有单位。
4. 分光计和分光光度计
分光光度计的分光特性是指单色器的单色性能、就是分出单色光通带宽多少、一般可以通过狭缝调节带宽、狭缝越小带宽越小、光强也随之变小!
5. 分光光度计特点分析
原子吸收分光光度法特点
1.选择性高,干扰少。共存元素对待测元素干扰少,一般不需分离共存元素。
2.灵敏度高。火焰原子化法:10-9g/mL;石墨炉: 10-13g/mL
3.测定的范围广。测定70多种元素。
4.操作简便、分析速度快。
5.准确度高。火焰法误差<1% ,石墨炉法3%-5%。
6. 分光光度计特点有哪些
许多有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱,因此可用紫外分光光度法对有机物质进行定性鉴定,结构分析及定量测定.紫外分光光度法定量测定的依据是比耳定律。
首先确定化合物的紫外吸收光谱,确定最大吸收波长。在选定的波长下,作出化合物溶液的工作曲线,根据在相同条件下测得待测液的吸光度值来确定待测液中化合物的含量。凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物,根据在特定吸收波长处所测得的吸收度,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。可见-紫外分光光度计。其应用波长范围为200~400nm的紫外光区、400~850nm的可见光区。主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理机、自动记录器及显示器等部件组成。7. 分光光度计的特点
狭缝宽度过小或过大均导致叶绿素定量结果的相对误差增大,但仪器的波长偏移是引起测定结果误差的主要原因。
波长偏差超过1nm时会影响混合溶液中叶绿素b的定量结果以及叶绿素的相对比值(Chla/Chlb),波长“蓝移”引起Chla/Chlb偏高,波长“红移”则导致Chla/Chlb偏低。
波长偏移及波长重现性差是造成Chla/Chlb比值偏离其“理论比值”、导致测定数据之间缺少可比性的原因。
选择具有波长自动校准功能、波长精度高、狭缝宽度在1-2nm的分光光度计用于叶绿素含量及其比值的测定则可获得可比性强、重现性好、准确度高的结果