1. 分光光度计检查皿差
比色皿配对比较麻烦，一般在分光光度法测定时采用比色皿误差测定后进行样品的测定。
1、比色皿配对
样品溶液先配成吸收度在0.6～0.8之间的浓度测定，然后用同批溶剂将溶液稀释一倍，再测吸收度。
从供试品溶液的配制起，平行操作两次，并注明测定时的温度。
同一台仪器测定所得二份结果间的偏差应不超过l％。当结果符合要求后，对各台仪器测得的平均值进行统计，若相对标准偏差不超过1.5％，则以测得的平均值为相应药物的吸收系数。
现行的国家检定规程中规定配对的两只比色皿间差值不得超过±0.5%。因为在可见光区，玻璃比色皿和石英比色皿都可以使用，所以可利用每对比色皿间的透光率直接进行比较。
使用4对比色皿，在波长500nm 下，以空气和纯水为介质，使用透光率T 进行测量，将每组比色皿中的一只透射率调为100%，测量另外一只透光率，凡透射率之差不大于5% ( △T = 0.005 =0.5%) ，即可配对使用。
2、比色皿误差测定与样品测定
2.1、任意取用2只清洁比色皿。
2.2、2只比色皿中加入相同的空白溶液。
2.3、以其中的任何一只比色皿为空白皿，调节仪器的吸收度为0；
2.4、测定另一只比色皿的吸收度，测得值为A0。用此比色皿测定样品，仪器的显示值为A，则样品的真实测得值A样＝A-A0
2. 分光光度计杯差
差式分光光度法的优点：
1灵敏度高；
2仪器设备简单，操作简便、快速；
3应用广泛。
3. 分光光度计的检定
1、将分光光度计开关打开，然后打开比色池盖子，通电预热20分钟。
2、旋转灵敏度档，将灵敏度当为调制1档，转动波长调节器将波长旋转至测定波长。
3、将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。关上比色池盖子，调节T为100.0.
4、将开关置于T，在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，用光量粗调和光量细调调节T。使读数盘的指针指向t=0处。
5、盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。
6、将开关置于A，用消光调零调节A为0.0，将校准液或待测液推入光路，测量溶液的吸光度（A），读数记录。
7、对比完成，关闭电源，取出器皿，用软布清洗干净。
4. 分光光度计比色皿厚度
根据吸光度（A）与透光度（率）T的关系公式：A= -lgT可得：A = -lg(50/100)= -(lg5-1)= 1-lg5≈ 1-0.6989=0.3011 （注释：lg5≈0.6989）通过2cm比色皿时,其透光率为：A'=2×A=0.6022A'=-lgT',T'=10^-0.6022≈0.0218所以,透光度为2.18%；吸光度为0.6022.
5. 分光光度计 皿
因各比色皿之间的透光率有点差异，所以要测试比色皿之间的差，以免影响空白和标准曲线的绘制以及测定样品结果的准确性。