1. 分光光度计调零
1、首先在使用紫外分光光度计前，用户应先了解仪器的结构和工作原理，以及各个操作旋钮的功能。在未接通电源前，应对仪器进行检查，电源线接线应牢固，通地要良好，各个调节旋钮的起始位置要正确，然后接通电源开关。
2、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T” ，波长调至测试用波长。仪器预热30 分钟。
3、打开试样室盖，调节“0”旋钮，使数字显示为“0。00”盖上试样室盖，将比色皿架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100％”旋钮，使字显示为“100。0
2. 分光光度计的校正包括
此现象说明仪器该重新校正，重新调零。
3. 分光光度计使用方法
打开比色暗箱，把标准溶液放在第一个框中，将透射比调为100，关上暗箱，再将透射比调为0，再揭开暗箱，看一下透射比，再调为100，将这个步骤重复进行多次，将待测分光度溶液放入暗箱，拉动按钮，每拉动一下就会动一格，进行吸光度的测试，做完后放到最后面，关闭暗箱，关掉电源。
4. 分光光度计校准
分光光度计在使用过程中，由于机械振动，温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因，经常会引起刻度盘上的波长读数与实际通过溶液的波长不符合的现象，从而导致仪器灵敏度降低，影响测定结果的精度，需要经常校正。 校正波长读数的方法多样，在可见光区校正波长最简便的方法是采用镨钕滤光片，测出529nm和808nm处的2个吸收峰最大吸收波长。如果测出的最大吸收波长与仪器标示值相差3nm以上,则需要细微调节波长刻度校正螺钉（不同型号的仪器波长读数的校正方法有所不同，应按仪器说明书进行波长调节）。如果测出的最大吸收波长与仪器波长标示值差大于±10nm，则需要重新调整钨灯泡位置，或检修单色器的光学系统。（应请计量部门或送生产厂检修，不可自己打开单色器）。 在紫外光区校正波长比较实用的方法是采用苯蒸汽的吸收光谱检查校正波长读数。苯蒸汽在紫外区有特征吸收峰，用它来检查波长读数操作非常方便。你只要在吸收池内滴一滴液体苯，盖上吸收池盖，待苯挥发充满整个吸收池后，就可测绘苯蒸汽的吸收光谱。若实测结果与已知数据不一致表示仪器有波长误差，可调整波长分度盘标值。
5. 721分光光度计
1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。 2.将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。） 3.根据所需波长转动波长选择钮。 4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。 5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向T=0处。 6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的T=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。 7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。 原理:（一）郎伯-比尔定律 光是一种电磁波,具有一定的波长和频率。可见光的波长范围在400~760nm，紫外光为200~400nm，红外光为760~500000nm。可见光因波长不同呈现不同颜色，这些波长在一定范围内呈现不同颜色的光称单色光。太阳或钨丝等发出的白光是复合光，是各种单色光的混合光。利用棱镜可将白光分成按波长顺序排列的各种单色光，即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等，这就是光谱。有色物质溶液可选择性地吸收一部分可见光的能量而呈现不同颜色，而某些无色物质能特征性地选择紫外光或红外光的能量。物质吸收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱，由于物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同，因此每种物质都有特定的吸收光谱，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。 在比色分析中，有色物质溶液颜色的深度决定于入射光的强度、有色物质溶液的浓度及液层的厚度。当一束单色光照射溶液时，入射光强度愈强，溶液浓度愈大，液层厚度愈厚，溶液对光的吸收愈多，它们之间的关系，符合物质对光吸收的定量定律，即Lambert-Bear 定律。这就是分光光度法用于物质定量分析的理论依据。
6. 可见光分光光度计使用方法
一、可见分光光度计开机
1、开机前，检查电源插座是否接上；
2、启动电源开关，仪器显示“723C”
3、仪器经自测后，按“MODE”键后再按“2”键，仪器显示“DATA”
二、可见分光光度计基本使用方法
1、按“GO TO λ”键，输入设定波长；
2、四个比色皿，其中R位置放置参比试样，其余三个放入待测试样。将比色皿放入样品池内的比色皿架中，盖上样品池盖；
3、将参比试样推入光路，按“ABS%”键，使仪器自动调零和置满度；
4、然后将待测试样推入光路，显示试样的吸光度值；
5、如果要想将待测试样的数据打印出，只需按“START/STOP”键即可。
可见分光光度计使用注意事项：
1、每天使用结束后，应仔细检查样品室内是否有溶液溢出，若有溢出必须随时用滤纸吸干；
2、可见分光光度计仪器使用完毕，用防尘套罩住。
紫外可见分光光度计用法简要过程
开机：打开电脑以及分光光度计。
软件的打开：直接点击图标，然后从菜单栏，文件——打开，找到相关标线打开。（另一种方法，从我的电脑——紫外——找到标线打开）
点击connection，机器自检，待自检结束，点击“OK”（若实验前机器处于打开状态就不会出现自检）
调零：首先在里面一个通道放装有蒸馏水的比色皿（放入比色皿后一定要把盖关闭），调零。然后再外面一个通道放装有蒸馏水的比色皿，观察吸光度，选择最小的一个，然后再次调零。（多点几次调零键，以确保调零）
测样：用选择好的比色皿测试，首先用要测得样品润洗比色皿两到三次。然后倒入样品（注意，拿比色皿时，不要碰到光滑面，用手指捏住毛面即可，倒液体尽量不要溢出到光面，如有溢出，用擦镜纸擦干，观察，没有水珠和痕迹，再放入通道中。以免影响吸光度。）
在数据栏，ID栏敲入数字编码，然后把光标放在浓度或者吸光度栏，点击read，得吸光度。（测样品时应多取几次样品做平行，直到结果数字相近）测量结束后，保存数据并把数据抄录下来，做进一步的计算分析。
断开连接，点击unconnention。一次关闭分光光度计，电脑。关掉电源。用蒸馏水清洗用过的比色皿，放回原处。把实验台上整理干净。
吸附实验流程：取适当初始浓度的样品，加入适量管——震荡或者搅拌一定时间——离心分离——取样，稀释至50ml——分光光度计检测——记录数据
注意：
1，离心分离时要选择一样的管，并且倒入相同的样品。
2，实验过程要做好详细记录。
3，实验结束把用过的仪器，器皿，清洗干净，烘干。
三、粉末样品的制备
1．选择高质量的微栅网（直径3mm），这是关系到能否拍摄出高质量高分辨电镜照片的第一步；（注：高质量的微栅网目前本实验室还不能制备，是外购的，价格20元/只；普通碳膜铜网免费提供使用。）
2．用镊子小心取出微栅网，将膜面朝上（在灯光下观察显示有光泽的面，即膜面），轻轻平放在白色滤纸上；
3．取适量的粉末和乙醇分别加入小烧杯，进行超声振荡10~30min，过3~5 min后，用玻璃毛细管吸取粉末和乙醇的均匀混合液，然后滴2~3滴该混合液体到微栅网上（如粉末是黑色，则当微栅网周围的白色滤纸表面变得微黑，此时便适中。滴得太多，则粉末分散不开，不利于观察，同时粉末掉入电镜的几率大增，严重影响电镜的使用寿命；滴得太少，则对电镜观察不利，难以找到实验所要求粉末颗粒。建议由老师制备或在老师指导下制备。）
4．等15 min以上，以便乙醇尽量挥发完毕；否则将样品装上样品台插入
7. 722分光光度计使用方法
（1）预热仪器 将选择开关置于“T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开，使光路切断。
（2）选定波长 根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长。
（3）固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下，尽可能采用灵敏度较低的挡，使用时，首先调到“1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%”和“100%”。选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。
（4）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”（此时试样室是打开的）。
（5）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。
（6）吸光度的测定 将选择开关置于“A”，盖上试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开试样室盖，切断光路。重复上述测定操作1～2次，读取相应的吸光度值，取平均值。
（7）浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。
（8）关机 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架用软纸擦净。
8. 分光光度计
荧光分光光度计与荧光光度计的区别在于两者之间的分光系统,前者可以采用色散型单色器,可对入射和发射光波长进行选择,可进行入射/ 发射波长扫描,多见于大型通用仪器;后者采用滤光片,具有固定的光谱通带,一般用于专用仪器中。
9. 分光光度计的工作原理
分光度计主要是检测，黑色金属材料所含元素，以及合金元素的，化学成分的定量分析的比色法测定，有色金属材料的所含元素的化学成分的定量分析的比色法测定，以及还有稀有元素的定量分析的比色法测定，还有有机材料元素的定量分析的比色法测定。