1. 分光光度计原理
分光光度计的类型很多，最常用的是可见分光光度计和紫外－可见光分光光度计。各种类型的分光光度计的结构和原理基本相同，一般包括光源、单色器、比色杯、检测器和显示器五大部分。
光源:分光光度计上常用的光源有两种:钨丝灯或氢灯,在可见光区,近紫外光区和近红外光区常用钨丝灯作为光源;在紫外光区多使用氢弧灯.
2. 分光光度仪
分光光度仪用来测量各种比色系统的绝对和差分测量值 。
测某个波长下的吸光度或透光度然后根据标准曲线得出该物质的浓度 。
积分球仪器在去除镜面反射测量时是不大适宜的，在去除镜面反射模式测量的结果往往是不大精确的。这是因为任一样品的弧度和纹路将会引起镜面反射光不进入积分球的去除镜面反射孔，并使一些（常常是不稳定的）镜面反射光错误地包括在测量内。即积分球仪器去除镜面反射是不完全去除镜面反射，检测器或光栅在接收信号时将漫反射和镜面反射光都同时检测了，与人眼观测模式不同。因为人眼在观测样品时，都是完全去除镜面反射的。
3. 荧光分光光度计原理
有些物质，当用紫外光照射时，它吸收某种波长之后还会发射出各种颜色和强度不同的光；而当紫外光停止照射后，这种光线也随之消失，这种光线称为荧光。荧光的波长比吸收的紫外光波长要长。
4. 分光光度法原理
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。
在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。
如以波长（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光光度法，也称为吸收光谱法。
用紫外光源测定无色物质的方法，称为紫外分光光度法；
用可见光光源测定有色物质的方法，称为可见光光度法。
它们与比色法一样，都以Lambert-Beer定律为基础。上述的紫外光区与可见光区是常用的。但分光光度法的应用光区包括紫外光区，可见光区，红外光区。紫外分光光度计，可见分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。
5. 分光光度计使用注意事项
老式分光光度计（早已淘汰）使用完全是手工操作，使用方法：首先打开电源开关，稳定5分钟，使分光光度计呈测量状态，将被测定的溶液倒入玻璃比色杯中，依此将空白管（内装蒸流水丿，标准管，测量管放入比色槽内，以空白管校准零点，轻拉比色拉杆，依此标准，被测溶液进行比色，读取各自吸光度，然后计算被测浓度结果。（注：用分光光度计检测检验项目，只能适用于终点法）。