1. 分光光度计基线校正
双光束紫外分光光度计调零是为了将一个波长的吸光度校正一致归零。
在参比池和样品池均放入装有空白液的比色皿，点击基线，将一定波长范围的光度都调为零，后在样品池放入待测液体，即可进行光谱测量或者双波长其及以上多波长的测量；
通俗说就是自动凋零就是将单个波长调为零，基线校正就是将一个范围内的波长均调为零。
2. 分光光度计波长校正
紫外分光光度计扫描，从大波长到低波长，最大吸收峰都会标注出来，可以选择一个各个峰吸收值都较大的波长做高效液相。
3. 分光光度校准曲线
要做好工作曲线,也就意味着使工作曲线的相关系数接近1.那么要求在实验过程中我们需要在实验的准备、配制标准系列和测量中做好各种细节,以达到最大程度减少误差,从而得到相关系数接近1的工作曲线.
4. 分光光度计的调校与使用
在检测过程中使用最多的的光度计为紫外分光光度计。在检测前需要检查探头光源是否稳定，设定波长是否有偏差等。还需要对分光光度计进行归零校准。
归零校准的具体步骤如下
将比色皿用纯水清洗干净，装入适量纯水，并用滤纸将比色皿的玻璃光面擦拭干净，双手拿住比色皿的毛玻璃面，放置于分光光度计的刻度槽内（注意，需要将光面对准探头），合上机盖。按下测试键，待读数稳定后，按下归零键，使读数稳定保持在0即可。
5. 分光光度计校准方法
分光光度计校正原理与方法
仪器出厂后在搬动过程中受到过震动以及仪器正常使用半年至一年后仪器的波长准确度会发生偏移，为此需进行波长正确度检查和校正，确保仪器的正常测试精度。
1.检查原理：
利用随机附件中的镨汝滤光片（呈浅蓝色的一块），固有的特征吸收峰529.8nm，采用逐点测试法来进行。
2.操作步骤：
（1）开机后将波长设定为580nm，打开试样室盖，用一张名片大小的白纸贴在样品室左侧正中央，此时可看到一个长方形的黄色光斑（完后将白纸拿掉）。
（2）将仪器设置为T档，波长设定为520nm，样品为空白，打开试样室盖，按▽/0%键使数显为000.0，然后关闭试样室盖，按△/100%键使数显为100.0。
（3）将镨汝滤光片作为被测样品放入试样室，依次调波长520nm, 522nm, 524nm, 526nm, 528nm, 530nm, 534nm, 536nm,逐点读出并记录各自所测得的T%值，
6. 分光光度计如何校正
①仪器的校正。开机预热30min后,用黑筒、标准白板,标准绿板进行校正,判定合格后方可使用。
②孔径的选择。分光光度N孔径的大小会影响测试结果, DataCulor SF 600x的孔径有XUSAV(3mm)、USAV(6.6mm),SAV(9mm),MAV(20mm)LAV(30mm),在没有特殊要求、布样面积足够大的情况下,应尽量选用大孔径进行测试,减少测试误差。
③测量。调出测试软件,把所测样品叠成至少四层,对准光孔压住,并按下测试键。旋转布样,重复测量三次,取得平均值。
④储存数据。若测量误差满足要求,按下存档,储存数据。
⑤CIE白度值。调出CIE白度值,启动打印机,并打印出数据结果.