荧光分光光度计与紫外分光光度计(荧光分光光度计和分光光度计)

海潮机械 2023-01-27 01:17 编辑:admin 273阅读

1. 荧光分光光度计和分光光度计

优点:灵敏度高,可以用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱,不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。缺点:

1、荧光的光强并不高,所以呈线性情况有时不很理想;

2、某些反应荧光持续的时间较短;

3、荧光的发散方向不集中,不像透射光那样集中,强度高;

4、受某些离子的干扰影响,荧光会湮灭,试验速度必须要快。

2. 荧光光谱和荧光分光光度计

分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。

钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。

3. 荧光光度计与分光光度计

光光度计称光谱仪(spectrometer)复杂光解光谱线科仪器测量范围般包括波范围380~780 nm见光区波范围200~380 nm紫外光区同光源都其特发射光谱,采用同发光体作仪器光源钨灯发射光谱:钨灯光源所发380~780nm波光谱光通三棱镜折射由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组连续色谱;该色谱作见光光光度计光源

4. 荧光分光光度计和分光光度计的主要区别

荧光测定需要单色性较高的激发光,通常会在光束进入样品之前经单色器分光,保留所感兴趣的激发波长或波段。

  较常见的单色器为棱镜或是光栅,在一些简易的荧光系统中也可使用滤波片。在该系统中,由激发光源发出的光经激发单色器分光获得特定波长的激发光,然后射入样品池,激发荧光物质的荧光发射。

   荧光分光光度计与荧光光度计的区别在于两者之间的分光系统,前者可以采用色散型单色器,可对入射和发射光波长进行选择,可进行入射/ 发射波长扫描,多见于大型通用仪器;后者采用滤光片,具有固定的光谱通带,一般用于专用仪器中。

5. 荧光分光光度计和分光光度计的光路主要区别

双光束比单光束的优点是双光束同时检测样品光路和背景光路,可以扣除背景波动的影响,而单光束要达到相同的效果需要经常校零。