分光光度计双光束(双光束分光光度计与单光束分光光度计)

海潮机械 2023-01-24 13:11 编辑:admin 274阅读

1. 双光束分光光度计与单光束分光光度计

束紫外可见光分光光度计工作原理:

双光束紫外可见分光光度计利用光谱分析方法对样品进行定性、定量分析,在有机化学、无机化学、生物化学、生命科学、药品分析、食品检验、医药卫生、环保、地质、冶金、石油、机械、商检和农业等各个领域都有广泛的应用。

双光束紫外可见分光光度计按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计,按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。双光束紫外可见分光光度计采用固体样品架、恒温水浴和自动进样器等适合于不同的应用。

2. 双光束分光光度计与单光束分光光度计计量区别

分光光度计介绍:

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。该仪器是食品厂、饮用水厂办理QS、HACCP认证的必备检验设备。

分光光度计原理:

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

分光光度计组成:主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

分光光度定义:

分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。

常用的波长范围:

(1)200~400nm的紫外光区

(2)400~760nm的可见光区

(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区

所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。

分光光度计的重要配件—— 比色杯

比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定。因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。

分光光度计操作方法:

1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。

2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较)。

3.根据所需波长转动波长选择钮。

4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。

6.盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。

7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。

分光光度计注意事项:

1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。

3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

3. 双光束分光光度计与单光束分光光度计的主要区别是

在单位时间内有两条波长不同的光束λ1和λ2交替照射同一个溶液,由检测器测出的吸收度是这两个波长下吸收度的差值△a。△a与被测定物质的浓度成正比,这个方法称双波长分光光度法。

双波长分光光度法的关键是正确选择两波长λ1、λ2,要求被测组分d在两波长处的△a足够大,而干扰组分g和背景在两波长应有相同的吸光度(△a=0)。为满足上述要求,一般是将λ2选在待测组分的最大吸收波长,λ1是选在干扰组分等吸收波长。

可测定浑浊样品,也可测定吸收光谱相互重叠的混合物样品,也是当杂质使主峰产生肩峰时测定主峰物质的较好定量方法。

4. 双光束分光光度计和单光束分光光度计

1、双光束分光光度计 以两束光一束通过样品、另一束通过参考溶液的方式来分析样品的分光光度计。

这种方式可以克服光源不稳定性、某些杂质干扰因素等影响,还可以检测样品随时间的变化等; 2、单光束分光光度计是由一束经过单色器的光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行光强度测量。这种分光光度计的特点是:结构简单 价格便宜 主要适于做定量分析; 缺点是:测量结果受电源的波动影响较大,容易给定量结果带来较大误差,此外,这种仪器操作麻烦,不适于做定性分析

5. 双光束分光光度计和单光束分光光度计的区别

一、从测量方式看区别单光束分光光度计是由一束经过单色器的光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行光强度测量的。双光束分光光度计是以两束光一束通过样品、另一束通过参考溶液的方式来分析样品的分光光度计。

二、从特点结构看区别单光束分光光度计的特点是:结构简单 价格便宜。双光束分光光度计方式特点是:可以克服光源不稳定性、某些杂质干扰因素等影响,还可以检测样品随时间的变化。

三、从精准都看区别单光束分光光度计测量结果受电源的波动影响较大,容易给定量结果带来较大误差。双光束分光光度计结构复杂,可实现吸收光谱的自动扫描,具有较高的测量精密度和准确度。

四、从适合分析来看区别单光束分光光度计结构复杂不适于做定性分析。双光束分光光度计特别适合进行结构分析。扩展资料一种结构简单的原子吸收光谱分析装置:其构造由空L阴极幻一、原子化器、光学系统及检测器组成。它仅有测量光束,无参比光束,故不能消除光源辐射的不稳定性。双光束原子吸收分光光度计为消除光裤不稳定产生测晕误差而影响重现性的仪器。用旋转扇形板将光源辐射分为参比光束和测量光束,交替进人检测系统,测定两个光束的强度比。光源强度变化刚,其强度比不变,光源不预热的情况下,仍可得到较好的稳定性。

6. 双光束分光光度计与单光束分光光度计哪个好

双光束分光光度计英文缩写

double beam spectrophotometer

7. 双光束分光光度计与单光束分光光度计优越性主要体现为

红外分光光度计特点: 灵敏,,快速和简便,在复杂组分系统中,不需要分离,即能检测出其中所含的极少量物质.

基本工作原理:用一定频率的红外线聚焦照射被分析的试样,如果分子中某个基团的振动频率与照射红外线相同就会产生共振,这个基团就吸收一定频率的红外线,把分子吸收的红外线的情况用仪器记录下来,便能得到全面反映试样成份特征的光谱,从而推测化合物的类型和结构。IR光谱主要是定性技术,但是随着比例记录电子装置的出现,也能迅速而准确地进行定量分析。

由光源发出的光,被分为能量均等对称的两束,一束为样品光通过样品,另一束为参考光作为基准。这两束光通过样品室进入光度计后,被扇形镜以一定的频率所调制,形成交变信号,然后两束光和为一束,并交替通过入射狭缝进入单色器中,经离轴抛物镜将光束平行地投射在光栅上,色散并通过出射狭缝之后,被滤光片滤除次光谱,再经椭球镜聚焦在探测器的接收面上。探测器将上述交变的信号转换为相应的电信号,经放大器进行电压放大后,转入A/D转换单位,计算机处理后得到从高波数到低波数的红外吸收光谱图。

8. 双光束分光光度计与单光束分光光度计相比其主要优点是

相同点:

(1)两者都属于吸收光谱;

(2)样品定量基础相同,均遵从朗伯-比尔定律;不同点:

(1)双波长等吸光度法不需空白溶液作参比;(2)单波长等吸光度法吸光度A受光源强度影响,双波长等吸光度法吸光度A与光源强度无关;

(3)双波长等吸光度法灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长分光光度法好;

(4)单波长等吸光度法,采用单色光路(束)或双色光路测量;双波长等吸光度法需要两个单色器进行测量;