1. 检测蛋白质的试剂
蛋白质的检测
(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应,蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。在碱性溶液中蛋白质与Cu2+形成紫红色络合物,其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比,而与蛋白质的分子量氨基酸成分无关,因此可用比色法测定蛋白质含量。在一定条件下,未知样品的溶液与标准蛋白质溶液同时反应,并于540~560nm下比色,可以通过标准蛋白质的标准曲线求出未知的蛋白质浓度。
2. 蛋白质谱
肽谱是肽谱分析图的简称
肽谱图分析(Peptide Mapping Analysis),是根据蛋白质、多肽的分子量大小以及氨基酸组成特点,使用多种蛋白酶分别对靶蛋白进行酶切和鉴定,在得到更多的碎裂肽段的同时,经过肽段之间的拼接获得蛋白的整个氨基酸序列信息。
3. 蛋白质含量检测方法
1、凯氏定氮法
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。
由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。
优点:可用于所有食品的蛋白质分析中;操作相对比较简单;实验费用较低;结果准确,是一种测定蛋白质的经典方法;用改进方法(微量凯氏定氮法)可测定样品中微量的蛋白质。
缺点:凯氏定氮法只是一个氧化还原反应,把低价氮氧化并转为氨盐来测定,而不能把高价氮还原为氮盐的形式,所以不可以测出物质中所有价态的氮含量。
4. 测定蛋白质
1. 向试管注入2ml的待测组织样液2. 向试管内注入双缩脲试剂A液1ml, 摇匀3. 向试管内注入双缩脲试剂B液4滴, 摇匀4. 观察试管中出现的颜色变化..若出现紫色反应, 这证明含有蛋白质
5. 检测蛋白质的试剂是什么
淀粉最直接的检验方法就是与碘溶液反应变为蓝色,这是淀粉的特征检验方法。
淀粉本身是一种多糖,以淀粉酶催化分解淀粉,与碘生成蓝色会消失。淀粉分解后会生成葡萄糖和少量麦芽糖,都含有醛基,因此可以与菲林试剂,土伦试剂,班氏试剂等醛基检验试剂反应。这也是检验淀粉的步骤。