1. 分光光度计的标定
使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源 开关 。仪器在使用前先检查一下，放大器暗盒的硅胶干燥筒(在仪器的左侧)，如受潮变色，应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶，烘干后再用。
2.将灵敏度旋钮调置“1”档(放大倍率最小)。
3.开启电源， 指示灯 亮，选择开关置于“T”，波长调至测试用波长。仪器预热20分钟。
4.打开试样室盖(光 门 自动关闭)，调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0”。
5.如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能置低倍率档使用，这样仪器将有更高的稳定性。但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。
6.预热后，按(4)连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。
7.吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”，将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
8.浓度C的测量：选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。
9.如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，(因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间)，当稳定后，重新调整“0”和“100%”即可工作
觉得有用点个赞吧
2. 分光光度计定义
比色法不是分光光度法。
原理不同：
比色法的原理是基于被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色，颜色深度和物质含量成正比，则根据光被有色溶液吸收的强度，即可测定溶液中物质的含量。
分光光度法的原理基于朗伯一比尔（Lambert - Beer）定律，在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法。
3. 分光光度计标定铁
（1）将灵敏度旋钮调置“1”档（放大倍率最小），打开样品室盖子。
（2）按电源开关（开关内2只指示灯亮），钨灯点亮；按氢灯开关（开关内左侧指示灯亮），氢灯电源接通；再按氢灯触发按钮（开关内右侧指示灯亮），氢灯点亮。仅器预热30min。
（3）选择开关置于“T”。
（4）打开试样室盖（光门自动关闭），调节“0% ”透光率旋钮，使数字显示为“000.0（T）”
(5)将波长置于所需要测的波长。
(6)将装有溶液的比色皿放置于比色皿架中。
(7)盖上样品室盖，将参比溶液比色皿置于光路，调节透光率100%旋钮，使数字显示为“100.0”[若显示不到100.0(T)，则可适当增加灵敏度的档数，同时应重复（4)，调整仅器的“OOO.O(T)”]。
（8）将被测溶液置于光路中，数字显示器上直接读出被测溶液的透光率（T)值。
（9）吸光度4的測量：参照（4)和（7)，调整仅器的“000.0”和“100.0”，将选择开关置于“A”，旋动吸光度调整旋钮，使得数字显示为“000.0”，然后移入被测溶液，显示其吸光度A。
(10)浓度C的测量：选择开关由“ A”旋至“C”，将已标定浓度的溶液移入光路，调节 “浓度”旋钮使得数字显示为标定值，将被测溶液移入光路，即可读出相应的浓度值。
(11)如果大幅度改变测试波长时，需要数分钟后，才能正常工作（因波长由长波向短波或由短波向长波移动时，光能量变化急剧，使光电管受光后响应缓慢，需有光移响应平 衡时间）。
（12）仅器在使用时，应常参照本操作方法中（4)和（7)进行调“000.0”和“ 100.0”的工作。
（13）每台仅器所配套的比色狐不能与其他仅器上的比色狐单个调换。
（14）仅器数字显示后背面带有外接插座，可输出模拟信号，插脚1为正，插脚2为负，接地线。
（15）仪器使用完毕后，应关机，罩上防尘罩，并及时更换干燥剂。比色皿用完后应清洗干净，擦干放于比色皿盒内。
4. 分光光度计的标定原理
目前投影和激光电视在宣传方面常用的亮度单位大致有流明、nit、fL，它们之间的差异其实还是蛮大的，极米君逐一做一下解释，看看它们间有什么区别？
流明
“流明”其实是国际单位制光度单位光通量。光通量反映了人眼对不同波长光的变化敏感度，是从一光源放射出的可见光的量度。每单位面积所接收到的光通量称为照度，投影机输出的光通常是用流明作为单位来衡量。但是由于标准不同，市面上存在三种流明单位的不同说法，分别为ANSI流明、ISO流明、光源流明。
ANSI流明是由美国国家标准学会制定的一个测量投影机的标准程序。这个程序对投影机画面不同的位置进行测量并取其平均值。作为市场用途，通过这个程序测得的投影机光通量往往会注明为“ANSI流明”，从而和用其他方法测量的仪器区别开，这也是极米君家产品主要采用的亮度单位。在投影机工业中，ANSI的流明测量法要比其他的测量方法准确。通过这个指标，投影仪之间基于亮度规格的比较更加方便。
ISO流明是由投影机制造厂商之一日本松下提议，推出的一套规范化的国际亮度标准：ISO/IEC21118。它是以日本办公机械与信息系统产业协会)投影机分会制定的投影机性能表示测定方法为基础，而制定的一套投影机检测标准。这个标准不仅仅规范了投影机的亮度标准，而是对技术用语、噪音等多项指标进行了明确的标定规范。
无论是ANSI流明、还是ISO流明其都代表的意义为通过镜头照射到屏幕的总的光通量大小，是投影设备本身的参量，与投影尺寸大小无关。而光源亮度与ANSI流明、ISO流明有很大差别，它指的是我们投影或者激光电视内所采用的光源自身的亮度，而投影光源通过镜头照射到屏幕的过程，需要经过多次折射、反射，不同的光机结构、不同的镜头以及各种元器件对光线的损耗不同，导致通过镜头照射到屏幕的总的光通量大小也不同，所以这个参数并没有任何实际用途，也无法作为投影仪之间亮度对比的参考。
总的来说，目前大多数投影厂商采用的都是ANSI流明来标注亮度，但是需要注意的是一些日系厂商往往会采用ISO流明来标注亮度，标准不同就无法做为对比参考。
nit尼特
在国际单位制光度单位中，除了光通量的单位流明之外，还有光亮度的单位坎德拉/平方米，而1坎德拉/平方米（cd/m2）则等于1 nit，目前我们电视、手机、显示器以及少部分激光电视产品采用nit（即坎德拉/平方米）作为亮度单位。nit表示人眼对发光体或被照射物体表面的发光或反射光强度实际感受的物理量，对投影机来说，可以理解为光通过屏幕反射后单位面积的人眼感受到的光强度。与流明标识的光通量不同，nit所标识光亮度与画面的面积息息相关，也就是说同一台激光电视，在投射80英寸时，它的nit值是要大于投射100英寸时的nit值。而且由于投影和激光电视的特殊性，在选购采用nit尼特单位标注亮度的产品时，不仅需要考虑投射画面尺寸，同时还要考虑幕布的增益系数。光亮度（nit单位）与光通量（ANSI流明）之间有一个大致的换算关系“光亮度=光通量*屏幕增益系数/（投影面积*π）”，在选购不同亮度标注的产品时，可以做一个大致的参考。
fL朗伯
与流明、nit不同，fL并不属于国际单位制光度单位，它得名自瑞士数学家、物理学家及天文学家约翰·海因里希·朗伯。fL其实与nit并无太大区别，都是反映了光通过屏幕反射后单位面积的人眼感受到的光强度，投射画面尺寸、幕布的增益系数都直接影响到它的数值大小，不同的是fL主要作为影院的亮度单位出现，比如一些电影院的RealD 6FL厅，就是突出了这个影厅亮度高的特色，达到了6fL。
由于电影院往往给人的亮度感觉很高，所以一些投影产品会以超出影院亮度标准为噱头进行宣传，但是需要注意的是尽管影院的放映机光通量很高，但是由于影院画面尺寸远大于家用场景，所以影院的光亮度实际上相对于家用投影和激光电视来说并不高，这也是为什么电影院要在近乎全黑的场景下放映的重要原因之一。以350ANSI流明的投影为例，在卧室环境下使用，它的光亮度已经相对于14fL左右，这已经超过了以高亮度著称的RealD 6FL厅，所以家用投影产品以fL作为亮度单位，并宣称超过影院的亮度标准，对于用户来说也没有太大的参考价值。
5. 分光光度计标定曲线
分光光度法的标准曲线定义：标准曲线是直接用标准溶液制作的曲线，是用来描述被测物质的浓度(或含量)在分析仪器响应信号值之间定量关系的曲线。 绘制标准曲线意义：绘制标准曲线的实用意义就是只要测得其吸光度值即可在标准曲线上查出相应的浓度值。
物质与光作用，具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。
由于不同的物质其分子结构不同，对不同波长光的吸收能力也不同，因此具有特征结构的结构集团，存在选择吸收特性的最大实收波长，形成最大吸收峰，而产生特有的吸收光谱。
即使是相同的物质由于其含量不同，对光的吸收程度也不同。
利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质的存在（定性分析），或利用物质对一定波长光的吸收程度来测定物质含量（定量分析）的方法，称为分光光度法。