台式分光光度计(台式分光光度计操作)

海潮机械 2023-01-16 15:43 编辑:admin 114阅读

1. 台式分光光度计操作

开机后在控制面板上选择光度测定,进入单波长测定,点击波长项,输入测定波长确定,然后放入空白样品调零,接着放入待测样品测定吸光度即可

2. 台式分光光度计操作方法

1)预热仪器。为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热 20min ,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。

2 )选定波长。根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。

3 )固定灵敏度档。根据有色溶液对光的吸收情况,为使吸光度读数为 0.2-0.7 ,选择合适的灵敏度。为此,旋动灵敏度档,使其固定于某一档,在实验过程中不再变动。一般测量固定在“ 1 ”档。

4 )调节“ 0 ”点。轻轻旋动调“ 0 ”电位器,使读数表头指针恰好位于透光度为“ 0 ”处(此时,比色皿暗箱盖是打开的,光路被切断,光电管不受光照)。

5 )调节 T=100 %。将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第一格内,有色溶液放在其它格内,把比色皿暗箱盖子轻轻盖上,转动光量调节器,使透光度 T=100 %,即表头指针恰好指在 T=100 %处。

6 )测定。轻轻拉动比色皿座架拉杆,使有色溶液进入光路,此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度 A 。读数后,打开比色皿暗箱盖。

7 )关机。实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。

3. 台式分光光度计操作流程

1.打开仪器电源开关,开启比色皿暗箱盖,调节“0”电位器旋纽,使电表指针处于透光率(T)“0”位,预热约20分钟。 2.调节波长(λ)调节旋纽,选择需用的单色光波长。 3.调节灵敏度开关,选择适当的灵敏度。再用调“0”旋纽复校电表透光率“0”位。 4.将比色皿暗箱盖合上,将参比溶液(空白)推入光路,顺时针旋转“100%”电位器调节旋纽使电表指针处于透光率“100%”处。 5.按上述方式连续几次调整透光率“0”及“100”,直至不变,即可进行测定工作。 6.将校准溶液和待测溶液推入光路,读取校准溶液吸光度(A)值。 7.将待测溶液推入光路,读取待测溶液吸光度值。 8.根据校准溶液和待测溶液吸光度值及校准溶液浓度计算待测物浓度。

4. 分光光度计怎么操作

1.在接通电源之前,电表的指针必须位于“0”刻度线,否则应旋转电表上的校正螺丝调节到位。

2.打开比色皿室的箱盖和电源开关, 使光电管在无光照射的情况下预热 15min 以上。

3.旋转波长调节器,选择测定所需的单色光波长。 选择适当的灵敏度,一般先将灵敏度旋钮调至中间位置,用零点调节器调节电表指针至 T 值为 10%处。 若不能调到,应适当增加灵敏度。

4.放入空白溶液和待测溶液,使空白溶液置于光路中,盖上比色皿室箱盖,使光电管受光,调节光量调节旋钮使电表在 T 值为100%处。

5.打开比色皿室箱盖(关闭光门),调节零点调节器使指针在 T 值为 0%处,然后盖上箱盖(打开光门),调节光量调节旋钮使指针在 T 值为 100%处。如此反复调节,直到关闭光门时和打开光门时指针分别在 T 值为 0%和 100%处为止。

6.将待测溶液置于光路中,盖上箱盖,由此时指针的位置读得待测溶液的 T 值或 A 值。

7.测量完毕后,关闭开关,取下电源插头,取出比色皿洗净擦干、放好。 盖好比色皿暗箱,盖好仪器。

5. 分光光度计的操作

使用仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前,应该对仪器的安全性进行检查,电源线接线应牢固。通地要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再接通电源 开关 。仪器在使用前先检查一下,放大器暗盒的硅胶干燥筒(在仪器的左侧),如受潮变色,应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶,烘干后再用。

  2.将灵敏度旋钮调置“1”档(放大倍率最小)。

  3.开启电源, 指示灯 亮,选择开关置于“T”,波长调至测试用波长。仪器预热20分钟。

  4.打开试样室盖(光 门 自动关闭),调节“0”旋钮,使数字显示为“00.0”,盖上试样室盖,将比色皿架置与蒸馏水校正位置,使光电管受光,调节透过率“100%”旋钮,使数字显示为“100.0”。

  5.如果显示不到“100.0”,则可适当增加微电流放大器的倍率档数,但尽可能置低倍率档使用,这样仪器将有更高的稳定性。但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。

  6.预热后,按(4)连续几次调整“0”和“100%”,仪器即可进行测定工作。

  7.吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”,将选择开关置于“A”,调节吸光度调零旋钮,使得数字显示为“.000”,然后将被测样品移入光路,显示值即为被测样品的吸光度值。

  8.浓度C的测量:选择开关由“A”旋置“C”,将已标定浓度的样品放入光路,调节浓度旋钮,使得数字显示为标定值,将被测样品放入光路,即可读出被测样品的浓度值。

  9.如果大幅度改变测试波长时,在调整“0”和“100%”后稍等片刻,(因光能量变化急剧,光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间),当稳定后,重新调整“0”和“100%”即可工作

6. 分光光度计基本操作

分光光度计介绍:

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。该仪器是食品厂、饮用水厂办理QS、HACCP认证的必备检验设备。

分光光度计原理:

分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

分光光度计组成:主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

分光光度定义:

分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。

常用的波长范围:

(1)200~400nm的紫外光区

(2)400~760nm的可见光区

(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光区

所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。

分光光度计的重要配件—— 比色杯

比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积,有比色杯和毛细比色杯等。一般测试核酸和紫外定量蛋白,均采用石英杯或者玻璃杯,但是不适合比色法测定。因为反应中的染料(如考马斯亮兰)能让石英和玻璃着色,所以必须采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。

分光光度计操作方法:

1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟。

2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较)。

3.根据所需波长转动波长选择钮。

4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处,用擦镜纸擦清外壁,放入样品室内,使空白管对准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器,使读数盘指针指向t=0处。

6.盖上暗箱盖,调节“100”调节器,使空白管的t=100,指针稳定后逐步拉出样品滑竿,分别读出测定管的光密度值,并记录。

7.比色完毕,关上电源,取出比色皿洗净,样品室用软布或软纸擦净。

分光光度计注意事项:

1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。

3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。