1. 紫外可见光光度计
1、机器开关在机器的右侧,按一下就会打开,有个小的屏幕,可以按数字键来操作选项,测吸光值操作。
2、按数字键1,进入选项,有当前参数、吸光度等。
3、点击键盘上的GOTO键去设置,一般设置为600,输入直接按数字键就可以。输入之后按ENTER这个键,这个是确认键。
4、把样品放到比色皿里面,留一个比色皿方蒸馏水,将蒸馏水的比色皿放到第一个其余的依次放入。
5、盖上一起的盖子,拉环的位置正处于测定第一个比色皿的位置,这一步需要归零,按键盘上的ZREO键。
6、归零之后,开始依次用力拖动把手,显示屏上就会显示出对应的吸光度,依次纪录数值,就能完成测定吸光值的实验。
2. 紫外可见光光度计主要部件
分光光度法分析的原理是利用物质对不同波长的光呈现选择性吸收现象来进行物质的定性和定量分析。
本仪器根据相对测量原理先设定参比样品(溶剂、蒸馏水、空气等)的透射比为100%,再测量待测样品的透射比,从而达到分析的目的。测得的透射比与待测样品的浓度之间的关系,在一定范围内符合郎伯-比尔定律。
3. 紫外可见光光度计吸光度范围
紫外吸光度是由于价电子的跃迁而产生的。利用物质的分子或离子对紫外和可见光的吸收所产生的紫外可见光谱及吸收程度可以对物质的组成、含量和结构进行分析、测定、推断。
在有机化合物分子中有形成单键的σ电子、有形成双键的π电子、有未成键的孤对n电子。当分子吸收一定能量的辐射能时,这些电子就会跃迁到较高的能级,此时电子所占的轨道称为反键轨道,而这种电子跃迁同内部的结构有密切的关系。
紫外吸光度有σ→σ*、n→σ*、π→π*和n→π*四种类型,
各种跃迁类型所需要的能量依下列次序减小: σ→σ*>n→σ*>π→π*>n→π*
由于一般紫外可见分光光度计只能提供190~850nm范围的单色光,因此,我们只能测量n→σ*的跃迁,n→π*跃迁和部分π→π*跃迁的吸收,而对只能产生200nm以下吸收的σ→σ*的跃迁则无法测量。
紫外吸光度是带状光谱,分子中存在一些吸收带已被确认,其中有K带、R带、B带、E1和 E2带等。
K带是二个或二个以上π键共轭时,π电子向π * 反键轨道跃迁的结果,可简单表示为π→π *。
R带是与双键相连接的杂原子(例如C=O、C=N、S=O等)上未成键电子的孤对电子向π * 反键轨道跃迁的结果,可简单表示为 n→π *。
E1 带和E2 带是苯环上三个双键共轭体系中的π电子向π*反键轨道跃迁的结果,可简单表示为 π→π *。
B带也是苯环上三个双键 共轭体系中的π→π * 跃迁和苯环的振动相重叠引起的,但相对来说,该吸收带强度较弱。
以上各吸收带相对的波长位置由大到小的次序为:R、B、K、E2、 E1 ,但一般K和E带常合并成一个吸收带。
4. 紫外可见光光度计常用的光源
氘灯和氘钨灯的工作原理是:氘灯属于气体离子放电灯,其发光原理是利用灯泡内的高纯度氘气。通电工作时,阴极产生电子发射,高速电子碰撞氘气中的氘原子,激发氘原子产生连续紫外光谱。
因为氘灯发射的紫外线辐射具有稳定性好、寿命长、强度高的特点,因此常用作各种紫外分光光度计测量的连续光源;是高效液相色谱仪(HPLC)、紫外-可见分光光度计(UV)、原子吸收光谱仪(AA)和毛细管电泳仪(CE)等。
5. 紫外可见光光度计检定规程
紫外可见分光光度计详细操作流程及校准方法
1.紫外可见分光光度计光度测量在模式选择屏幕中选择<1.Photometric光度>选项,将显示参数配置屏幕;用GOTOWL键设定测量波长;按F2键设定进样控制;按START/STOP键时,测量开始,显示测量屏幕;如需做空白校正,应在测量前先设置空白样品,然后,按AUTO-ZERO键,将测量值置为OABS(100%);
2.紫外可见分光光度计校正开机预热10分钟足矣;放入黑块和标样(没有的自己配),关闭盖子;把灯光对着黑块,把透光度调0;把灯光对标样,将吸光度调到100%;
3.参比溶液介绍参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时,基体中,虽不含被测物质,但含有别的物质,这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质,此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。
4.紫外可见分光光度计使用注意事项1.开机前应先预热15分钟,然后开机自检;2.湿度要控制在75%左右,温度在5~30度之间;3.仪器要稳压电源,接地要好。并且避免阳光直接照射;
5.常见故障及处理方法光门不能完全关闭:修复光门部件,使其完全关闭;透过率“100%”旋到底了。解决方法:重新调整“100%”旋钮;仪器严重受潮:可打开光电管暗盒,用电吹风吹上一会儿使其干燥,并更换干燥剂;
6. 紫外可见光光度计工作原理
紫外-可见分光光度计。
原理如下:
单色光辐射穿过被测物质溶液时,在一定的浓度范围内被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系可以用朗伯-比尔定律表述如下:
式中
A为吸光度;
T为透光率;
E为吸收系数,常用的表示方法,其物理意义为当溶液浓度为1%(g/ml),液层厚度为1cm时的吸光度数值;
c为100ml溶液中所含物质的重量(按干燥品或无水物计算),g;
l(L)为液层厚度,cm。
上述公式中吸收系数也可以摩尔吸收系数ε来表示,其物理意义为溶液浓度c为1mol/L和液层厚度为1cm时的吸光度数值。在最大吸收波长处摩尔吸收系数表示为εmax。
物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。在一定条件下,物质的吸收系数是恒定的,且与入射光的强度、吸收池厚度及样品浓度无关。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸光度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称之为比色分析。
7. 紫外可见光光度计主要结构
(1)紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
(2)荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。可根据不同的物质其组成与结构调整所吸收的紫外-可见光波长和发射光的波长。
2、应用范围不同:
(1)紫外分光光度计主要用于实验室。例如:鉴定物质:根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是最大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。与标准物及标准图谱对照等。
(2)荧光分光光度法的灵敏度通常比分光光度法高2〜3个数量级。在卫生检验、环境及食品分析、药物分析、生化和临床检测等方面有着广泛的应用。
3、所用灯不同:
(1)紫外光区通常用氢灯或氘灯。
(2)荧光分光光度法通常用钨灯或卤钨灯。
4、优缺点:
(1)紫外分光光度计高自动化程度,维护方便、操作简便、效率高。
(2)荧光分光光度法具有检测灵敏度高、专属性较强和使用简便等特点,常用于微量甚至痕量毒物的定量分析。
8. 紫外可见光光度计是测什么的
uv光检是紫外分光光度计检测。
9. 紫外可见光光度计由哪几个主要部件组成
应用的范围广泛,医药、化工、制造行业、环保等,凡是需要化验溶液成分的都能用上。比如地表水质监测仪表,测量总氮TN仪表就是使用紫外分光光度法原理。
10. 紫外可见光光度计操作规程
紫外可见分光分度计使用方法具体步骤:
步骤一 ,将紫外可见分光分度计电源线连接好;
步骤二, 按动设备开机开关预热;
步骤三, 把相关样品溶液倒入比色皿中;
步骤四 ,点击键盘设置最后点击确定 ;
步骤五 ,依次纪录数值就能完成测定吸光值的实验 ;
步骤六 ,使用完毕后关上电源 并取出比色皿清洗干净。