1. 微量分光光度计使用
1、打开仪器电源开关，开启比色皿暗箱盖，调节“0”电位器旋纽，使电表指针处于透光率（T）“0”位，预热约20分钟。
2、调节波长（λ）调节旋纽，选择需用的单色光波长。
3、调节灵敏度开关，选择适当的灵敏度。再用调“0”旋纽复校电表透光率“0”位。
4、将比色皿暗箱盖合上，将参比溶液（空白）推入光路，顺时针旋转“100％”电位器调节旋纽使电表指针处于透光率“100%”处。
5、按上述方式连续几次调整透光率“0”及“100”，直至不变，即可进行测定工作。
6、将校准溶液和待测溶液推入光路，读取校准溶液吸光度（A）值。
7、将待测溶液推入光路，读取待测溶液吸光度值。
8、根据校准溶液和待测溶液吸光度值及校准溶液浓度计算待测物浓度。
2. 微量分光光度计操作方法
邻菲啰啉分光光度法测定铁含量的原理：
在pH=2~9的溶液中，邻二氮菲与2价亚铁离子（Fe2+）发生显色反应，该反应的选择性很高，而且生成的橙红色络合物非常稳定，lgK稳=21.3（20℃），其溶液在510nm（可见光）有最大吸收峰，利用此显色反应，可以用可见光分光光度法测定微量铁。
物质与光作用，具有选择吸收的特性。有色物质的颜色是该物质与光作用产生的。即有色溶液所呈现的颜色是由于溶液中的物质对光的选择性吸收所致。由于不同的物质其分子结构不同，对不同波长光的吸收能力也不同，因此具有特征结构的结构集团，存在选择吸收特性的最大实收波长，形成最大吸收峰，而产生特有的吸收光谱。
该法测得的铁含量为试样中的亚铁的含量。因为只有2价铁与邻菲啰啉形成橘红色的络合物。而3价铁不发生这个显色反应，但能生成浅蓝的络合物。
扩展资料：
邻菲啰啉的性质：
1、邻菲啰啉指示剂可通过将1.485g一水合邻二氮菲和0.695gFeSO4·7H2O溶于100mL水中来配制。用于硫酸高铈滴定铁盐的指示剂。一个相关的配体是红菲绕啉（BPT），4,7-二苯基-1,10-邻二氮菲。
2、邻菲啰啉也可用于烷基锂化合物含量的分析。使样品与少量（约1mg）的邻二氮菲作用，呈深色，再用醇类滴定，直到达到无色的滴定终点。
3、虽然显色反应的适宜pH值范围很宽（pH=2~9），但测定时，通常在pH=5的HAc-NaAc缓冲介质中测定。
参考资料：
3. 微量分光光度计使用方法
盐酸羟胺是还原剂，目的是将三价铁全部还原成二价铁，然后和邻二氮菲进行显色反应。
4. 微量分光光度计使用方法 blank
对于经常做实验的人来说，对于需要测量的实验来说，误差有的时候是一个非常致命的结果。所以对于误差的分析是每一个研究人员必须严肃对待的问题，下面就介绍几种分析误差的方法，让你的实验结果经过分析得到更加准确的结果。 步骤/方法
1 选择合适的分析方法 (1) 根据试样的中待测组分的含量选择分析方法。高含量组分用滴定分析或重量分析法；低含量用仪器分析法。 (2) 充分考虑试样共存组分对测定的干扰，采用适当的掩蔽或分离方法。 (3) 对于痕量组分，分析方法的灵敏度不能满足分析的要求，可先定量富集后再进行测定 .
2 减小测量误差 →称量：分析天平的称量误差为±0.0002g，为了使测量时的相对误差在0.1%以下，试样质量必须在0.2 g以上。 →滴定管读数常有±0.0l mL的误差，在一次滴定中，读数两次，可能造成±0.02 mL的误差。为使测量时的相对误差小于0.1%，消耗滴定剂的体积必须在20 mL以上，最好使体积在25 mL左右，一般在20至30mL之间。 →微量组分的光度测定中，可将称量的准确度提高约一个数量级 。
3 减小随机误差 在消除系统误差的前提下，平行测定次数愈多，平均值愈接近真实值。因此，增加测定次数，可以提高平均值精密度。在化学分析中，对于同一试样，通常要求平行测定（parallel determination）2-4次。
4 消除系统误差 由于系统误差是由某种固定的原因造成的，因而找出这一原因，就可以消除系统误差的来源。有下列几种方法。 (1) 对照试验 -contrast test (2) 空白试验 - blank test (3) 校准仪器 -calibration instrument (4) 分析结果的校正 -correction result
5 整理系统误差 (1) 对照试验 →与标准试样的标准结果进行对照 ; 标准试样、管理样、合成样、加入回收法。 →与其它成熟的分析方法进行对照 ; 国家标准分析方法或公认的经典分析方法。 →由不同分析人员，不同实验室来进行对照试验。 内检、外检。 (2) 空白试验 空白实验：在不加待测组分的情况下，按照试样分析同样的操作手续和条件进行实验，所测定的结果为空白值，从试样测定结果中扣除空白值，来校正分析结果。 消除由试剂、蒸馏水、实验器皿和环境带入的杂质引起的系统误差，但空白值不可太大。 (3) 校准仪器 仪器不准确引起的系统误差，通过校准仪器来减小其影响。例如砝码、移液管和滴定管等，在精确的分析中，必须进行校准，并在计算结果时采用校正值。 (4) 分析结果的校正 校正分析过程的方法误差，例用重量法测定试样中高含量的 SiO 2 ，因硅酸盐沉淀不完全而使测定结果偏低，可用光度法测定滤液中少量的硅，而后将分析结果相加。
5. 微光分光光度计
积分光源从外观上看是一个空腔球体.内壁上涂有白色漫反射材料市场上 又称光度球,光通球等.在被测物体表面上能够保证光源全方位照射到。
积分球均匀光源的种类有:积分球均匀光源、LED积分球均匀光源、便携式积分球均匀光源、微光积分球均匀光源。
6. 微量分光光度计的原理
分光光度法的实验原理是： 1、光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是显色反应的条件和测定吸光度的条件。显色反应的条件有显色剂的用量，介质的酸度、显色时温度、显色时间及干扰物质的消除方法等；测量吸光度的条件包括入射光波长的选择、吸光度范围和参比溶液等。 2、二氮杂菲-亚铁络合物：邻二氮杂菲是测定微量铁的一种较好的试剂。在pH=2～9的条件下Fe2+离子与邻二氮杂菲生成稳定的橘红色络合物，此络合物的lgK稳=21.3,摩尔吸光系数ε510=1.1×104 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3＋离子还原为Fe2＋离子，其反应式如下： 2Fe3＋+2NH2OH·HCl→2Fe2＋+N2+2H2O+4H++2Cl- 测定时，控制溶液酸度在pH=5左右较为适宜。酸度过高，反应进行较慢；酸度太低，则Fe2+离子水解，影响显色。 Bi3+，Cd2+，Hg2+，Ag+，Zn2+等离子与显色剂生成沉淀，Ca2+，Cu2+，Ni2+等离子与显色剂形成有色络合物。因此当这些离子共存时，应注意它们的干扰作用。