1. 双光束分光光度计与单
一、开机
依次打开打印机、计算机、仪器主机电源。
二、仪器初始化
在计算机窗口上双击图标，仪器进行自检,大约需要四分钟。如果自检各项都显示正确，预热半小时后，便可任意进入以下操作。
三、光度测量
1.参数设置
单击按钮，进入光度测量。单击，设置光度测量参数，具体输入：1．波长数；2．相应波长值（从长波到短波）；3．测光方式（一般为T%或Abs）；4．重复测量次数，是否取平均值，单击确认键退出设置参数。
2.校零
单击,将两个样品池中都放入参比溶液，单击。校完后，取出外池参比溶液。
3.测量
倒掉取出的参比溶液，放入样品溶液，单击；即可测出样品的Abs值。
四、光谱扫描
参数设置
单击，进入光谱扫描。单击，设置光谱扫描参数。
1.波长范围（先输长波再输短波）；
2.测光方式（一般为T%或Abs）；
3.扫描速度（一般为中速）；
4.采样间隔（一般为1nm或0.5nm）；
5．记录范围（一般为0--1）。单击
基线校正
单击，将两个样品池中都放入参比溶液单击存入基线，取出外池参比溶液。
2. 分光光度计是测什么的
分光光度法
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与不同波长相对应的吸收强度。如以波长（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光光度法，也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的方法，称为紫外分光光度法；用可见光光源测定有色物质的方法，称为可见光光度法。它们与比色法一样，都以Lambert-Beer定律为基础。上述的紫外光区与可见光区是常用的。但分光光度法的应用光区包括紫外光区，可见光区，红外光区。紫外分光光度计，可见分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。
波长范围
(1)200～400nm的紫外光区，(2)400～760nm的可见光区， (3)2.5～25μm(按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>)的红外光区。
检测仪器
紫外分光光度计，可见分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。
基本原理
分光光度法
当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为:
根据朗伯(Lambert)-比尔(Beer)定律:
A=abc
式中A为吸光度，b为溶液层厚度（cm），c为溶液的浓度（g/dm^3)， a为吸光系数。其中吸光系数 与溶液的本性、温度以及波长等因素有关。溶液中其他组分（如溶剂等）对光的吸收可用空白液扣除。
由上式可知，当固定溶液层厚度l和吸光系数a时，吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时，首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况（吸收光谱），从中确定最大吸收波长 ，然后以此波长 的光为光源，测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A，作出A~c工作曲线。在分析未知溶液时，根据测量的吸光度A，查工作曲线即可确定出相应的浓度。这便是分光光度法测量浓度的基本原理。
3. 分光光度计原理
束紫外可见光分光光度计工作原理：
双光束紫外可见分光光度计利用光谱分析方法对样品进行定性、定量分析，在有机化学、无机化学、生物化学、生命科学、药品分析、食品检验、医药卫生、环保、地质、冶金、石油、机械、商检和农业等各个领域都有广泛的应用。
双光束紫外可见分光光度计按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计，按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。双光束紫外可见分光光度计采用固体样品架、恒温水浴和自动进样器等适合于不同的应用。
4. 可见分光光度计
uv1800紫外分光光度计正确操作流程：
一、开机预热
1、打开仪器样品室盖板，拿出其中用于干燥的硅胶袋。确保样品室光路无物体阻挡。再关上样品室盖板。
2、打开仪器右侧下部电源开关，仪器即进入自检程序。自检过程中不得打开样品室盖板。
3、自检结束，再按仪器面板上的“F4”键，仪器即可切换至由电脑控制。
4、启动电脑，点击软件UV Probe, 出现对话框后，点击下部的“Connect”按钮。
二、样品准备
1、样品以适当的溶剂溶解。注意：不能用氯仿！因其可导致比色皿散架！二氯甲烷亦应慎用。常用溶剂为水及醇类。
2、测样前确认比色皿是玻璃的还是石英的？因玻璃在紫外区有吸收，作紫外光谱扫描要用石英比色皿，一般其上部标上“S”或“Q”的标志。
三、样品测定
1、在软件界面选择windows按钮，下拉，选择Spectrum按钮，点击，即出现光谱测量界面。
2、将样品的溶剂分别倒入两个比色皿中，加至比色皿约2/3的高度，再盖上方形比色皿顶盖（以免溶剂挥发而影响测定结果）。手持比色皿粗糙面（毛面），用擦镜纸轻轻擦净比色皿光面。
3、将两个比色皿放入样品室的比色皿架中。其中一个为参比架，一个为样品架（默认为靠外侧的比色皿架）。
4、在Spectrum界面单击Baseline，选定波长为800~200 nm， 启动基线校正操作。
5、Baseline操作结束，选择＂Go To WL＂，在对话框中输入500 (nm)。点击确定。
6、再点击“Autozero”，以消除两个比色皿之间的误差。
7、拿出样品架的比色皿，加入待测样品至2/3高度。
8、点击“Start”。仪器即开始扫描光谱。
9、扫描结束，右侧窗口即可出现光谱图。一般要保持吸光度在0.1～1.0之间较为合适。如果样品太浓，稀释后再重新测定。调整横轴和纵轴到合适的范围。点击光谱图可查看相关的参数，如：吸收峰等。
10、点击“File”---“Save as”可保存当前的文件。
此处只介绍紫外光谱的测定方法。其它测量（如：光度定量测量、动力学等）详见说明书。
四、关机
1、测量完毕，将比色皿从样品池中取出。
2、 点击软件下部的按钮“Disconnect”，退出软件窗口。
3、关闭仪器右下侧的电源开关。
5. 722分光光度计
扣除溶液空白误差，任何物质原则上都会吸收的，就像确定米尺零点一样，空白对照就是零点。分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：
(1)200～400nm的紫外光区(2)400～760nm的可见光区，(3)2.5～25μm（按波数计为4000cm<-1>～400cm<-1>）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。
为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。