1. 分光光度计280
这是测核酸浓度和纯度用的。用紫外分光光度计测量样品时，不同成分的样品会有不同的吸光度。260纳米（nm）是核酸的最高吸收峰的吸收波长，280nm则是蛋白和酚类的。一般用A260/A280来检验DNA和RNA的纯度，纯DNA的这个比值约为1.8，纯RNA约为2.0.。
2. 分光光度计使用注意事项
使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源 开关 。仪器在使用前先检查一下，放大器暗盒的硅胶干燥筒(在仪器的左侧)，如受潮变色，应更换干燥的蓝色硅胶或者倒出原硅胶，烘干后再用。
2.将灵敏度旋钮调置“1”档(放大倍率最小)。
3.开启电源， 指示灯 亮，选择开关置于“T”，波长调至测试用波长。仪器预热20分钟。
4.打开试样室盖(光 门 自动关闭)，调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上试样室盖，将比色皿架置与蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示为“100.0”。
5.如果显示不到“100.0”，则可适当增加微电流放大器的倍率档数，但尽可能置低倍率档使用，这样仪器将有更高的稳定性。但改变倍率后必须按(4)重新校正“0”和“100%”。
6.预热后，按(4)连续几次调整“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。
7.吸光度A的测量按(4)调整仪器的“00.0”和“100%”，将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“.000”，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
8.浓度C的测量：选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，即可读出被测样品的浓度值。
9.如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻，(因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间)，当稳定后，重新调整“0”和“100%”即可工作
3. 分光光度计280nm波长不稳定
紫外分光光度法最适合分析的波长在近紫外区200～280nm、这个区间吸收系数比较大、特征性强！
4. 分光光度计操作规程
1.在接通电源之前，电表的指针必须位于“0”刻度线，否则应旋转电表上的校正螺丝调节到位。
2.打开比色皿室的箱盖和电源开关， 使光电管在无光照射的情况下预热 15min 以上。
3.旋转波长调节器，选择测定所需的单色光波长。 选择适当的灵敏度，一般先将灵敏度旋钮调至中间位置，用零点调节器调节电表指针至 T 值为 10%处。 若不能调到，应适当增加灵敏度。
4.放入空白溶液和待测溶液，使空白溶液置于光路中，盖上比色皿室箱盖，使光电管受光，调节光量调节旋钮使电表在 T 值为100%处。
5.打开比色皿室箱盖（关闭光门），调节零点调节器使指针在 T 值为 0%处，然后盖上箱盖（打开光门），调节光量调节旋钮使指针在 T 值为 100%处。如此反复调节，直到关闭光门时和打开光门时指针分别在 T 值为 0%和 100%处为止。
6.将待测溶液置于光路中，盖上箱盖，由此时指针的位置读得待测溶液的 T 值或 A 值。
7.测量完毕后，关闭开关，取下电源插头，取出比色皿洗净擦干、放好。 盖好比色皿暗箱，盖好仪器。
5. 分光光度计的组成
紫外-可见分光光度计由5个部件组成：
①辐射源。
必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。
②单色器。
它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。
容器的光程一般为0.5～10厘米。
④检测器，又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。
近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。
⑤显示装置。
这部分装置发展较快。较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
6. 分光光度计原理
分光光度计的应用原理：是采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光线透过测试的样品后，部分光线被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度，样品的吸光值与样品的浓度成正比。
7. 分光光度计使用方法
1）预热仪器。为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热 20min ，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。
2 ）选定波长。根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。
3 ）固定灵敏度档。根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度读数为 0.2-0.7 ，选择合适的灵敏度。为此，旋动灵敏度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“ 1 ”档。
4 ）调节“ 0 ”点。轻轻旋动调“ 0 ”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“ 0 ”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）。
5 ）调节 T=100 ％。将盛蒸馏水（或空白溶液或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度 T=100 ％，即表头指针恰好指在 T=100 ％处。
6 ）测定。轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度 A 。读数后，打开比色皿暗箱盖。
7 ）关机。实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。