紫外分光光度计动力学(分光光度计动力学测定)

海潮机械 2023-01-25 20:03 编辑:admin 175阅读

1. 分光光度计动力学测定

可见光度计(又名可见分光光度计、分光光度计)开发出能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);上海美析仪器动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描,分析物质的特征波长,判断实验过程的误差);还有可以进行DNA/蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等等,广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。V-1300型可见分光光度计,波长范围:320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。

2. 分光光度计动力学测定时间导出范围

uv1800紫外分光光度计正确操作流程:

一、开机预热

1、打开仪器样品室盖板,拿出其中用于干燥的硅胶袋。确保样品室光路无物体阻挡。再关上样品室盖板。

2、打开仪器右侧下部电源开关,仪器即进入自检程序。自检过程中不得打开样品室盖板。

3、自检结束,再按仪器面板上的“F4”键,仪器即可切换至由电脑控制。

4、启动电脑,点击软件UV Probe, 出现对话框后,点击下部的“Connect”按钮。

二、样品准备

1、样品以适当的溶剂溶解。注意:不能用氯仿!因其可导致比色皿散架!二氯甲烷亦应慎用。常用溶剂为水及醇类。

2、测样前确认比色皿是玻璃的还是石英的?因玻璃在紫外区有吸收,作紫外光谱扫描要用石英比色皿,一般其上部标上“S”或“Q”的标志。

三、样品测定

1、在软件界面选择windows按钮,下拉,选择Spectrum按钮,点击,即出现光谱测量界面。

2、将样品的溶剂分别倒入两个比色皿中,加至比色皿约2/3的高度,再盖上方形比色皿顶盖(以免溶剂挥发而影响测定结果)。手持比色皿粗糙面(毛面),用擦镜纸轻轻擦净比色皿光面。

3、将两个比色皿放入样品室的比色皿架中。其中一个为参比架,一个为样品架(默认为靠外侧的比色皿架)。

4、在Spectrum界面单击Baseline,选定波长为800~200 nm, 启动基线校正操作。

5、Baseline操作结束,选择"Go To WL",在对话框中输入500 (nm)。点击确定。

6、再点击“Autozero”,以消除两个比色皿之间的误差。

7、拿出样品架的比色皿,加入待测样品至2/3高度。

8、点击“Start”。仪器即开始扫描光谱。

9、扫描结束,右侧窗口即可出现光谱图。一般要保持吸光度在0.1~1.0之间较为合适。如果样品太浓,稀释后再重新测定。调整横轴和纵轴到合适的范围。点击光谱图可查看相关的参数,如:吸收峰等。

10、点击“File”---“Save as”可保存当前的文件。

此处只介绍紫外光谱的测定方法。其它测量(如:光度定量测量、动力学等)详见说明书。

四、关机

1、测量完毕,将比色皿从样品池中取出。

2、 点击软件下部的按钮“Disconnect”,退出软件窗口。

3、关闭仪器右下侧的电源开关。

3. 分光光度计动力学测定原理

酶促反应的初速率是反应刚开始时的速率,控制酶的量一定,加入不同量的底物,有的可以用分光光度法等实时监测产物生成量,不能实时监测的话就在反应一段时间后取样用HPLC测定产物浓度,用HPLC监测最主要的是确定多长时间内取样才能代表初速度,有的是几分钟,有的是几小时,这个要根据产物生成的量来判断,然后用单位时间内产物的生成量代表反应初速率

4. 分光光度计光度测量

分光光度法的主要特点为:

(1)应用广泛由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。

到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。 在国际上发表的有关分析的论文总数中,光度法约占28%,我国约占所发表论文总数的33%。

(2)灵敏度高由于新的显色剂的大量合成,并在应用研究方面取得了可喜的进展,使得对元素测定的灵敏度有所推进,特别是有关多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到数十万。

(3)选择性好目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。 (4)准确度高对于一般的分光光度法,其浓度测量的相对误差在1~3%范围内,如采用示差分光光度法进行测量,则误差可减少到0 X%。

(5)适用浓度范围广可从常量(1%~50%)(尤其使用示差法)到痕量(10-8~10-6%)(经预富集后)。(6)分析成本低、操作简便、快速由于分光光度法具有以上优点,因此目前仍广泛地应用于化工、冶金、地质、医学、食品、制药等部门及环境监测系统。

单在水质分析中的应用就很广,目前能有直接法和间接法测定的金属和非金属元素就有70多种。

5. 分光光度计动力学测定方法

  T表示透光度(Trans), A表示吸光度(Absorbance), C表示浓度(Conc), F表示斜率(Factor)。  可见分光光度计(又名可见光度计、分光光度计)是可见光分光光度法是上海美析仪器采用最新的单片机技术,开发出能够进行定量测量(标准曲线测量,可对物质进行浓度直读);OD值直接测量(吸光度、透过率和能量等直读);动力学测试(测出物质浓度随时间变化OD值的变化);光谱扫描(可以对某一种物质进行全波段扫描,分析物质的特征波长,判断实验过程的误差);多波长测试(可以对物质同时进行多个波长的测试,分析物质的相关特性);还有可以进行DNA/蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等等,广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。V-1500PC型可见分光光度计,波长范围:320nm-1100nm,能满足不同物质的测试。

6. 光电分光光度计

分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。

钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。