1. 蛋白质热稳定性检测
常规项目有:
感官检验:颜色、气味、滋味等;
酒精试验:加入酒精,观察是否有沉淀出现,可考察奶的新鲜和热稳定度;
抽检率较高的项目:
酸度试验:酸度滴定法,测试牛奶酸度,考察其新鲜和稳定性;
抽检项目:
乳房炎试验:加入乳房炎试剂,观察是否有沉淀出现。
各种验假试验等
除了这些检验项目外,还需下列检验:
乳质成分检验:乳脂肪、乳蛋白、乳糖比例检验;
安定度试验:加热后观察状态,考察热稳定性,同时也是发现“纯假奶”的重要手段。
离心沉淀试验:用离心法观察状态,考察奶结构,是发现“均质后奶”(意味着掺假)和掺假奶(悬浮于奶中的添加物)的重要手段。
酸度试验:有现场抽检变为必检项目。
细菌总数检验,多种验假试验等。
对于制造“无抗奶”的,还需做抗生素检验
2. 蛋白质热稳定性试验
lea蛋白是指胚胎发育晚期丰富蛋白是植物胚胎发生后期种子中大量积累的一类蛋白质。
LEA、LEA蛋白
根据蛋白质的氨基酸基序和保守结构特点,LEA蛋白一般分为6组,其中第1组LEA蛋白(LEA1)含有高度保守的20氨基酸基序。LEA1蛋白在水溶液中主要呈无规则结构,具高亲水性和热稳定性,与植物抗逆功能密切相关。
3. 热不稳定性蛋白
多肽链中氨基酸残基的组成和排列顺序称为蛋白质的一级结构,连接一级结构的键是肽键。
蛋白质的二级结构是指蛋白质主链原子的局部空间结构,并不涉及氨基酸残基侧链构象,二级结构的种类有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲。
氢键是维系二级结构最主要的键。
三级结构是指多肽链主链和侧链原子的空间排布。
次级键维持其稳定, 最主要的键是疏水键。
四级结构是指两条以上具有三级结构的多肽链之间缔合在一起的结构。
其中每条具有三级结构的多肽链称为亚基,一般具有四级结构的蛋白质才有生物学活性。
维持其稳定的是次级键,如氢键、盐键、疏水键、范德华力等。
4. 蛋白质的活性测定
Folin-酚法蛋白定量包括两步反应:第一步生成蛋白质一铜络合物; 第二步是酚基将磷钥酸、磷钨酸试剂还原. 试剂甲由A(4%碳酸钠溶液与0.2mol/L氢氧化钠溶液等体积混合)和B(1%硫酸铜溶液与2%的酒石酸钾钠溶液等体积混合)两种溶液组成.你说的加了甲后10min再加乙,因为第一步反应肯定要时间的,试剂甲当然不能省了,其他的不说,它最起码提供了碱性的反应条件,Folin-酚法测定蛋白酶活力的原理是蛋白酶水解酪蛋白产生Tyr, 在碱性条件下,Tyr与Folin试剂反应生产蓝色物质,于680nm比色测定光吸收值,计算酶活力。
要绘制 Tyr标准曲线,这两个共同的步骤是第二步显色反应.
5. 蛋白质稳定性试验
蛋白质工程(protein engineering)是根据蛋白质的结构和生物活力之间的关系,利用基因工程的手段,按照人类需要定向地改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质。 蛋白质工程与基因工程密不可分。基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内,并在其中进行表达,它的产品还是该基因编码的天然存在的蛋白质。蛋白质工程则更进一步根据分子设计的方案,通过对天然蛋白质的基因进行改造,来实现对其所编码的蛋白质的改造,它的产品已不再是天然的蛋白质,而是经过改造的,具有人类需要的优点的蛋白质。天然蛋白质都是通过漫长的进化过程自然选择而来的,而蛋白质工程对天然蛋白质的改造则是加快了的进化过程,能够更快、更有效地为人类的需要服务。 传统的常规诱变及筛选技术虽然能够创造一个突变基因,产生一个突变蛋白,但这种诱变方法是随机的,很少能导致靶基因或靶蛋白发生改变;在蛋白质水平上的化学修饰虽然能够改变天然蛋白,但其工艺十分繁杂,甚至不能进行,而且由于基因没有改变,不能再产生所修饰的蛋白质。蛋白质工程则不存在这些问题,所以当人们需要某种具有一定特性的蛋白质时,可以通过蛋白质工程,在基因水平上定做一个非天然变异蛋白质。也就是说,蛋白质工程制造的蛋白质的特点是:天然不存在的(人工设计制作)、经特异性改造的和在基因水平上改变的。 蛋白质工程的研究内容包括:通过改变蛋白质的活性部位,提高其生物功效;通过改变蛋白质的组成和空间结构,提高其在极端条件下的稳定性,如酸、碱、酶稳定性;通过改变蛋白质的遗传信息,提高其独立工作能力,不再需要辅助因子;通过改变蛋白质的特性,使其便于分离纯化,如融合蛋白b-半乳糖苷酶(抗体);通过改变蛋白质的调控位点,使其与抑制剂脱离,解除反馈抑制作用等。 研究中通常采用的方法有:在蛋白质分子中引入二硫键以提高蛋白质的稳定性;减少半胱氨酸残基数目以避免错误折叠的可能性;置换天冬酰胺、谷氨酰胺或其他氨基酸,以修饰酶的催化特异性或增加酶的活性等。这些研究首先要对该蛋白质的精细结构和功能关系有深入的了解,具备必要的催化化学和结构化学的知识,然后才能运用基因工程的原理和技术,开展蛋白质工程的探索实验。
6. 蛋白热稳定性分析软件
AAP化学物质是高效木材阻燃剂-聚磷酸铵。用作添加型阻燃剂。受热分解时生成氨及非常稳定的聚合磷酸,可成为高分子聚合物的保护层而将氧隔绝。也可与其他阻燃剂复合使用。其分子通式为(NH3)n+2PnO3n+1。阻燃剂-聚磷酸铵为白色粉末,密度1.74;在强酸溶液中断链生成磷酸铵。近于中性,分散性好,与其他物质不起反应。热稳定性好,分解温度不低于250℃,低毒。